DESENVOLVIMENTO DE NOVOS MÉTODOS MOLECULARES PARA O DIAGNÓSTICO DE THEILERIA EQUI (PIROPLASMIDA: THEILERIIDAE)

Fernanda Barcelos Amaral; Roberto Teixeira de Oliveira; Sara Gomes De Andrade; Patrícia Gonzaga Paulino; Huarrisson Azevedo Santos

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Trabalho

Título do Trabalho

DESENVOLVIMENTO DE NOVOS MÉTODOS MOLECULARES PARA O DIAGNÓSTICO DE THEILERIA EQUI (PIROPLASMIDA: THEILERIIDAE)

Autores

Fernanda Barcelos Amaral
Roberto Teixeira de Oliveira
Sara Gomes De Andrade
Patrícia Gonzaga Paulino
Huarrisson Azevedo Santos

Modalidade

Resumo

Área temática

Ciências Agrárias - Medicina Veterinária

Data de Publicação

22/04/2025

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/xi-raic-e-v-raidtec-ufrrj/925043-desenvolvimento-de-novos-metodos-moleculares-para-o-diagnostico-de-theileria-equi-(piroplasmida--theileriidae)

ISBN

978-65-272-1295-9

Palavras-Chave

Piroplasmose equina, hsp70, filogenia, PCR

Resumo

A Piroplasmose equina é uma doença infecciosa transmitida por carrapatos, causada por protozoários hemoparasitos apicomplexos dos gêneros Babesia e Theileria. No cenário global, essa patologia acarreta prejuízos econômicos significativos em relação ao custo com o tratamento de animais doentes, e também quanto às restrições comerciais impostas ao trânsito internacional de equinos infectados. Apesar do alvo molecular 18S rRNA ser amplamente empregado no diagnóstico molecular de Theileria, esse não é eficaz na diferenciação das espécies que pertencem ao Equus grupo (Theileria equi e Theileria hanneyi) devido à seu alto grau de conservação, tornando o gene da proteína hsp70 uma opção de marcador mais específica para resolver relações em nível de espécie devido à sua conservação moderada. Sendo assim, objetivou-se com o presente estudo a aplicação do gene codificante da proteína de choque térmico 70 (hsp70) como alvo molecular para diagnóstico e diferenciação de espécies e estudos filogenéticos. Foram utilizadas 100 amostras de sangue de equinos provenientes das cinco regiões brasileiras e o DNA total foi extraído utilizando kit comercial. Foi realizada uma triagem por qPCR com alvo no 18S rRNA para seleção de amostras positivas para Theileria equi. Em seguida, as amostras positivas foram submetidas a PCR convencional amplificando um fragmento de 1700 pares de base do gene hsp70. As amostras foram sequenciadas e submetidas à análise filogenética, aplicando o método Bayesiana com 1.000.000 gerações e Maximum Likelihood com 1000 pseudoreplicas. O modelo de substituição escolhido foi GTR (general time reversible) com distribuição gama e sítios invariáveis. As amostras obtidas obtiveram uma faixa de 95 a 100% de identidade com a sequência de referência de hsp70 de T. equi depositado no GenBank. A inferência evolutiva demonstrou que o marcador molecular hsp70 obteve topologia similar ao 18S rRNA quanto a ordem Piroplasmida. Na análise filogenética as amostras Theileria equi se agruparam com alto valor de suporte (100%). O clado Theileria equi separou 100% de Theileria haneyi e do grupo Theileria strictus sensu. A distância genética entre as duas espécies é de 0,184, com um desvio padrão de 0,016. Esses resultados sugerem que Theileira do grupo Equus pode não ser classificada como Theileria strictus sensu ou uma espécie Babesia s.s., mas sim representar um grupo monofilético separado. Além disso, a análise filogenética do gene hsp70 identificou dois genótipos de T. equi circulantes no Brasil. A distância genética entre as sequências de T. equi foi calculada em 0,009, com desvio padrão de 0,001. A capacidade do hsp70 de diferenciar genótipos dentro de T. equi é particularmente importante para a epidemiologia e controle da Theileriose Equina. A identificação e utilização de novos alvos moleculares para o estudo filogenético permitiram definir com maior precisão a posição taxonômica de T. equi, além de aprimorar o diagnóstico da espécie. Isso é fundamental para otimizar as estratégias de prevenção e controle da doença em equinos no Brasil, contribuindo para a redução das perdas econômicas na produção equina em nível nacional. Aprovação CEUA: 6486110221

Título do Evento: XI Reunião Anual de Iniciação Científica da UFRRJ (RAIC 2024) & V Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação (RAIDTec 2024)
Cidade do Evento: Seropédica
Título dos Anais do Evento: Anais da XI Reunião Anual de Iniciação Científica da UFRRJ (RAIC) e V Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação (RAIDTec): Transição energética: impactos ambientais e sociais
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

AMARAL, Fernanda Barcelos et al.. DESENVOLVIMENTO DE NOVOS MÉTODOS MOLECULARES PARA O DIAGNÓSTICO DE THEILERIA EQUI (PIROPLASMIDA: THEILERIIDAE).. In: Anais da XI Reunião Anual de Iniciação Científica da UFRRJ (RAIC) e V Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação (RAIDTec): Transição energética: impactos ambientais e sociais. Anais...Seropédica(RJ) UFRRJ, 2024. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/xi-raic-e-v-raidtec-ufrrj/925043-DESENVOLVIMENTO-DE-NOVOS-METODOS-MOLECULARES-PARA-O-DIAGNOSTICO-DE-THEILERIA-EQUI-(PIROPLASMIDA--THEILERIIDAE). Acesso em: 01/07/2025