MECANISMO DE S-NITROSAÇÃO DA HTRX A PARTIR DE ESPECTROSCOPIA DE RMN

João Pedro Gama D'Elia; Vitor dos Santos Almeida; FABIO CENEVIVA LACERDA DE ALMEIDA

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Trabalho

Título do Trabalho

MECANISMO DE S-NITROSAÇÃO DA HTRX A PARTIR DE ESPECTROSCOPIA DE RMN

Autores

João Pedro Gama D'Elia
Vitor dos Santos Almeida
FABIO CENEVIVA LACERDA DE ALMEIDA

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Biologia Estrutural

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/319592-mecanismo-de-s-nitrosacao-da-htrx-a-partir-de-espectroscopia-de-rmn

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

S-nitrosação, proteína, hTrx, NMR

Resumo

A S-nitrosação de proteínas é um importante mecanismo de transdução de sinal via radical NO consistindo em modificação pós-traducional de cisteínas, podendo ter funções como aumento de estabilidade, regulação de atividade enzimática e de interação entre proteínas. A tiorredoxina humana (hTrx) é uma proteína globular que se destaca pelo seu papel fundamental na S-transnitrosação de diversos alvos biológicos, além do controle redox intracelular (BARGLOW et al., 2011). Ela possui em sua estrutura cinco resíduos de cisteínas (C32, C35, C62, C69 e C73) que são suscetíveis a S-nitrosação. O objetivo do trabalho é estudar a reatividade e estabilidade da hTrx e de dez mutantes (C32only, C35only, C62only, C69only, C73only - mutantes que possuem apenas uma cisteÍna no resíduo indicado e serinas nos omitidos - C62/C69 (C32S/C35S/C73S), C32/C35 (C62S/C69S/C73S), C73S, C35S e C69S), frente à S-nitrosoglutationa (GSNO), a fim de entender o mecanismo de S-nitrosação e S-transnitrosação da hTrx, e especificamente, o papel de cada sítio de S-nitrosação. A análise cinética da reação com o GSNO foi realizada por ressonância magnética nuclear (RMN), acompanhando a intensidade do sinal do Cß das cisteínas, podendo-se tirar constantes de velocidade de reação para cada um dos possíveis sítios de S-nitrosação de cada mutante com apenas uma cisteína. A partir dos dados experimentais in vitro, propomos um novo mecanismo de S-nitrosação da hTrx que envolve a transferência interna de NO entre os resíduos C73 e C62, e que não depende dos resíduos C32 e C35. Além disso, demonstramos o efeito cooperativo negativo entre os resíduos C62 e C69. Os mecanismos propostos abrem um caminho para o entendimento da via de sinalização por S-nitrosação de proteínas. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS: Barglow, K. T., Knutson, C. G., Wishnok, J. S., Tannenbaum, S. R., and Marletta, M. A. (2011) Site-specific and redox-controlled S-nitrosation of thioredoxin. Proc Natl Acad Sci U S A 108, E600-606

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

D'ELIA, João Pedro Gama; ALMEIDA , Vitor dos Santos Almeida ; ALMEIDA, FABIO CENEVIVA LACERDA DE. MECANISMO DE S-NITROSAÇÃO DA HTRX A PARTIR DE ESPECTROSCOPIA DE RMN.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/319592-MECANISMO-DE-S-NITROSACAO-DA-HTRX-A-PARTIR-DE-ESPECTROSCOPIA-DE-RMN. Acesso em: 21/07/2025