ANÁLISE DA RESPOSTA AO ESTRESSE DE RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO COMO MECANISMO DE CONTROLE DA MORTE DE CÉLULAS GANGLIONARES DA RETINA.

Victória Alícia Cunha Ferreira; Tadeu Monteiro da Silva Moraes; Daianne Neves Mandarino Torres; Gonçalves, B.S.; Vinicius de Toledo Ribas; Luciana Barreto Chiarini

Título do Trabalho

Autores

Victória Alícia Cunha Ferreira
Tadeu Monteiro da Silva Moraes
Daianne Neves Mandarino Torres
Gonçalves, B.S.
Vinicius de Toledo Ribas
Luciana Barreto Chiarini

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Biologia celular e molecular

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/319042-analise-da-resposta-ao-estresse-de-reticulo-endoplasmatico-como-mecanismo-de-controle-da-morte-de-celulas-ganglio

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

morte celular, sistema nervoso, retículo endoplasmático, UPR

Resumo

Introdução: A morte de células ganglionares da retina leva a perda da visão e pode ocorrer por danos no nervo óptico e em doenças como Glaucoma. A cultura de explantes de retina em desenvolvimento é um modelo para estudo da morte de células ganglionares induzida por axotomia. Nesta preparação é preservada a organização em camadas do tecido retiniano. Mostramos previamente que a apoptose das células ganglionares, neste modelo, é dependente da síntese proteica e de JNK. No entanto, os mecanismos pelos quais a axotomia leva a apoptose das células ganglionares não estão completamente esclarecidos. As vias ativadas em resposta ao estresse de Retículo endoplasmático (RE), chamada de UPR (Unfolded Protein Response), podem regular a sobrevivência e a morte celular. A UPR é formada pelas vias da PERK, IRE1a e ATF6. A IRE1 quando ativada fica fosforilada e pode ativar a JNK. A morte celular induzida pelo estresse de RE pode ter participação da JNK e da proteína CHOP. Objetivo: Neste trabalho analisamos se a axotomia das células ganglionares induz a resposta ao estresse de RE e se esta pode estar relacionada a morte das células ganglionares da retina. Métodos: Foram preparados explantes de retinas de ratos Lister Hooded recém-nascidos ou com até 1 dia pós-natal (P0/P1). Os explantes foram mantidos em cultura, com ou sem anisomicina, um inibidor de síntese proteica, por até 18 horas. Para detectar células apoptóticas foi feita imunofluorescência para caspase-3 clivada em cortes de explantes de retina. Para verificar a ativação de IRE1 foi feita imunofluorescência para a forma fosforilada de IRE1 (P-IRE1). Para marcar o DNA foi utilizado DAPI. A análise foi feita por microscopia de fluorescência e campo claro. Foi feita quantificação da percentagem de células com núcleos picnóticos e células positivas para caspase-3 clivada na camada de células ganglionares (GCL). A análise da expressão de CHOP foi feita por western blot. Resultados: Axotomia induziu clivagem de caspase-3 em células ganglionares da retina. Na presença de anisomicina, menos células na GCL apresentaram imunofluorescência para caspase-3 clivada. Foi detectado, por western blot, um aumento de CHOP após 3 ou 18 horas da axotomia. Verificamos uma forte marcação para P-IRE1 na GCL três horas após a axotomia, quando comparamos com a marcação em retinas fixadas imediatamente após a axotomia. Explantes mantidos na presença de anisomicina apresentaram fraca marcação de P-IRE1 e CHOP. Conclusão: Os dados mostram que a axotomia das células ganglionares da retina induziu a ativação da IRE1 e um aumento de CHOP, de forma dependente da síntese proteica. Assim, o efeito protetor da anisomicina pode ser devido a uma atenuação do estresse de RE. Os resultados estimulam a continuação da investigação do papel da UPR na morte de células ganglionares da retina. Apoio financeiro: FAPERJ, CNPq, PIBIC-CNPq e PIBIC-UFRJ.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

FERREIRA, Victória Alícia Cunha et al.. ANÁLISE DA RESPOSTA AO ESTRESSE DE RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO COMO MECANISMO DE CONTROLE DA MORTE DE CÉLULAS GANGLIONARES DA RETINA... In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/319042-ANALISE-DA-RESPOSTA-AO-ESTRESSE-DE-RETICULO-ENDOPLASMATICO-COMO-MECANISMO-DE-CONTROLE-DA-MORTE-DE-CELULAS-GANGLIO. Acesso em: 06/05/2025