COMPREENDENDO A FUNÇÃO DA PROTEÍNA PRION CELULAR A PARTIR DE ABORDAGENS IN VITRO E IN SILICO

Maria Heloisa de Oliveira Freire; Tácio Vinício Amorim Fernandes; Pedro Geraldo Pascutti; Rafael Linden; Yraima

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Trabalho

Título do Trabalho

COMPREENDENDO A FUNÇÃO DA PROTEÍNA PRION CELULAR A PARTIR DE ABORDAGENS IN VITRO E IN SILICO

Autores

Maria Heloisa de Oliveira Freire
Tácio Vinício Amorim Fernandes
Pedro Geraldo Pascutti
Rafael Linden
Yraima

Modalidade

Resumo apresentação oral curta

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Biofísica

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/319028-compreendendo-a-funcao-da-proteina-prion-celular-a-partir-de-abordagens-in-vitro-e-in-silico

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

proteína prion, interação proteína-proteína, proteína tipo scaffold, dicroísmo circular

Resumo

Introdução: Apesar da função fisiológica da proteína prion celular PrPC ser ainda alvo de debate, funções putativas são baseadas na interação da PrPC com moléculas presentes na superfície celular, tal como a proteína 1 induzível por estresse (STI1), o precursor do receptor de laminina (LRP) e a molécula de adesão celular neural (N-CAM). Atualmente considera-se que a PrPC possa atuar como uma plataforma sinalizadora na superfície celular, que pode ser regulada alostericamente quando ligada a algumas proteínas e cujos efeitos podem ser traduzidos em diferentes consequências funcionais (LINDEN et al., 2008, LINDEN et al., 2012, LINDEN et al., 2017). Objetivos: Avaliar se a interação da PrPC com mais de um ligante é possível e se a ordem de adição dos ligantes interfere na interação PrP-ligante e, dessa forma, tentar correlacionar os eventos de interação com a função fisiológica da PrPC. Material e Métodos: Para isso, utilizamos calorimetria de titulação isotérmica (ITC) a 25 ºC para avaliar a interação da PrPC murina recombinante full-length (resíduos 23-231) com os domínios isolados da LRP (resíduos 161-180), NCAM FNIII2 (resíduos 665-690) e STI1 (resíduos 230-245) previamente descritos como ligantes da PrPC. Além disso, realizamos o docking molecular em série da PrPC humana (PDB id 1QLZ) e murina (PDB id 1AG2) com os ligantes proteicos citados utilizando o HADDOCK webserver. Por fim, realizamos ensaio de dicroísmo circular (CD) com a PrPC murina recombinante (resíduos 23-231 e 90-231) a fim de investigar mudanças de estrutura secundária em decorrência da adição dos domínios isolados de STI1, LRP e NCAM FNIII2 em diferentes ordens. Resultados e Discussão: Os resultados obtidos por ITC revelaram interação entre a PrPC e STI1 e PrPC e LRP. No entanto, a ligação entre PrPC-NCAM FNIII2 não foi observada. Os modelos de interação fornecidos por docking molecular indica ligação potencial entre o domínio globular da PrPC humana e murina e cada um dos ligantes citados. A partir desses resultados, realizamos o docking molecular em série a fim de investigar a interação da PrPC com mais de um ligante em diferentes ordens e observamos que a afinidade do domínio globular da PrPC para cada um dos peptídeos é distinta e depende da ligação do peptídeo anterior. Além disso, nossos estudos de dicroísmo circular indicaram mudanças significativas de conteúdo de estrutura secundária na PrPC em decorrência da interação com os ligantes em diferentes ordens. Os ensaios de docking molecular serão refinados por dinâmica molecular a fim de entender a nível atômico o desencadeamento das mudanças conformacionais observadas no ensaio de dicroísmo circular. Conclusão: Nossos estudos fornecem evidências experimentais que reforçam a possibilidade de a PrPC atuar como uma plataforma de interação multicomponente e que pode ser modulada alostericamente por cada um desses ligantes. Referências Bibliográficas LINDEN, R. et al. Physiology of the prion protein. Physiol. Rev. 2008. 88, 673–728. LINDEN, R. et al. Allosteric function and dysfunction of the prion protein. Cell. Mol. Life Sci. 2012. 69, 1105–1124. LINDEN, R et al. The Biological Function of the Prion Protein: A Cell Surface Scaffold of Signaling Modules. Front. Mol. Neurosci. 2017. 20,10-77.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

FREIRE, Maria Heloisa de Oliveira et al.. COMPREENDENDO A FUNÇÃO DA PROTEÍNA PRION CELULAR A PARTIR DE ABORDAGENS IN VITRO E IN SILICO.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/319028-COMPREENDENDO-A-FUNCAO-DA-PROTEINA-PRION-CELULAR-A-PARTIR-DE-ABORDAGENS-IN-VITRO-E-IN-SILICO. Acesso em: 24/05/2025