DESLOCAMENTO QUÍMICO EM SOLUÇÃO DO DOMÍNIO SH2 DA PROTEÍNA ADAPTADORA GRB2

Aléxia Santos S. Valadares; Ramon Pinheiro Aguiar; FABIO CENEVIVA LACERDA DE ALMEIDA

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Trabalho

Título do Trabalho

DESLOCAMENTO QUÍMICO EM SOLUÇÃO DO DOMÍNIO SH2 DA PROTEÍNA ADAPTADORA GRB2

Autores

Aléxia Santos S. Valadares
Ramon Pinheiro Aguiar
FABIO CENEVIVA LACERDA DE ALMEIDA

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Biologia Estrutural

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/318911-deslocamento-quimico-em-solucao-do-dominio-sh2-da-proteina-adaptadora-grb2

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Grb2; SH2; RMN

Resumo

A Proteína Ligada ao Receptor do Fator de Crescimento 2 (Grb2) é uma proteína adaptadora que regula a atividade do receptor tirosina quinase FGFR2 antes dos estímulos extracelulares derivados dos fatores de crescimento de fibroblastos. O que é de suma importância para impedir que esse receptor seja ativado de forma total sem exposição a fatores de crescimento (HENRIQUE, 2017). A Grb2 possui um domínio homólogo a Src 2 (SH2) flanqueado por dois domínios homólogo a Src 3 (SH3), sendo eles N- e C-terminais (AHMED et al., 2013). O domínio SH2 é responsável pelo reconhecimento de tirosinas fosforiladas (pY) no processo de interação entre proteínas, resultando em propagação de sinal intracelular (PRETO, 2019). Tendo em vista a sua importância para a sinalização e consequentemente ativação do receptor ao qual a Grb2 está acoplado, o domínio SH2 torna-se um alvo para estudos. Criou-se a hipótese de que o domínio SH2 poderia apresentar a característica SOAP. Inicialmente o domínio SH2 foi expresso, em sistema heterólogo, de E coli, BL21(DE3), com a marcação isotópica com 15N. Em seguida, foram realizadas purificações, sendo elas por afinidade a níquel e de exclusão molecular, obtendo o domínio em estado líquido, para a sua utilização em experimentos de Ressonância Magnética Nuclear (RMN). Logo após, foi realizado o experimento de 15N, 1H-HSQC (do inglês, Heteronuclear Single Quantum Correlation), um experimento que apresenta a “impressão digital” da proteína, servindo como parâmetro estrutural. Sendo um experimento base para a averiguação de experimentos futuros. Os resultados obtidos nos diferentes pulsos e temperaturas, mostraram deslocamento químico na cadeia principal do domínio SH2, onde acredita-se que é característico do domínio SOAP. Afim de determinar se essa hipótese é verdadeira, posteriormente serão realizados experimentos de RMN adicionais, como NOESY, DOSY. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS AHMED, Z. et al. Grb2 controls phosphorylation of FGFR2 by inhibiting receptor kinase and Shp2 phosphatase activity. The Journal of Cell Biology, v.200, n. 4, p. 493–504, 2013. HENRIQUE, P. Estudos da Interação da Proteína Adaptadora Grb2 (Growth Factor Receptor-Bound Protein 2) com os Flavonoides Morina e Rutina. 2017. 82 f. Dissertação (Mestrado em Biofísica Molecular). Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, São José do Rio Preto, São Paulo, 2017. PRETO, R. Karoline Sanches. Dinâmica estrutural da proteína adaptadora Grb2, seu domínio SH2 e a interação com cumarina por ressonância magnética nuclear e fluorescência. 2019. 102 f. Dissertação (Mestrado em Biofísica Molecular). Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, São José do Rio Preto, São Paulo, 2019.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

VALADARES, Aléxia Santos S.; AGUIAR, Ramon Pinheiro; ALMEIDA, FABIO CENEVIVA LACERDA DE. DESLOCAMENTO QUÍMICO EM SOLUÇÃO DO DOMÍNIO SH2 DA PROTEÍNA ADAPTADORA GRB2.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/318911-DESLOCAMENTO-QUIMICO-EM-SOLUCAO-DO-DOMINIO-SH2-DA-PROTEINA-ADAPTADORA-GRB2. Acesso em: 23/05/2025