CARACTERIZAÇÃO DOS MECANISMOS DE ENTRADA DE ESTERÓIS EM TRYPANOSOMA CRUZI

Lívia Daflon da Silva; Miria Gomes Pereira; NARCISA LEAL DA CUNHA E SILVA

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Trabalho

DOI

10.29327/131086.1-54

Título do Trabalho

CARACTERIZAÇÃO DOS MECANISMOS DE ENTRADA DE ESTERÓIS EM TRYPANOSOMA CRUZI

Autores

Lívia Daflon da Silva
Miria Gomes Pereira
NARCISA LEAL DA CUNHA E SILVA

Modalidade

Resumo apresentação oral curta

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Parasitologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/318466-caracterizacao-dos-mecanismos-de-entrada-de-esterois-em-trypanosoma-cruzi

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Trypanosoma cruzi, endocitose, tráfego

Resumo

A endocitose representa uma das diversas vias que as células usufruem para o transporte de macromoléculas pela membrana plasmática. Como resultado, as células respondem ao meio em que se encontram e adquirem nutrientes que sustentam o metabolismo celular. A endocitose de lipoproteínas como LDL é uma das etapas importantes na aquisição do colesterol pelas células, o qual participa na produção de membranas, na regulação da fluidez, no armazenamento de estoques intracelulares, na produção de hormônios e ácidos biliares. A aquisição de LDL se dá por endocitose mediada por receptores ou por fase fluida em macrófagos de lesões ateroscleróticas (Goldstein & Brown, 1974; Schneider et al, 1982). As lipoproteínas seguem a rota endocítica alcançando os endossomas tardios/lisossomos. Em Trypanosoma cruzi, causador da doença de Chagas, o tráfego de colesterol está melhor caracterizado nas formas de desenvolvimento presentes no vetor. As lipoproteínas são internalizadas pelo complexo citóstoma-citofaringe e direcionadas à rota endocítica de epimastigotas, sendo armazenadas temporariamente nos reservossomos, os quais acumulam altas concentrações de colesterol e são organelas semelhantes a lisossomos (Pereira & Alcantara, 2020). O complexo citóstoma-citofaringe compreende um longo aprofundamento da membrana plasmática, sustentado por um quarteto e um triplete de microtúbulos, formando uma espécie de canal para o interior celular (Pereira & Alcantara, 2020). Em T. cruzi, há hiatos atrelados à captura de LDL. As vesículas que brotam do fundo da citofaringe não foram observadas contendo revestimento proteico semelhante à clatrina, fato este que contrasta com a endocitose mediada por receptores em mamíferos. Por outro lado, há uma parte da membrana da citofarine em que não há microtúbulos, e o tráfego de vesículas da via secretória e o brotamento de vesículas a partir desse domínio têm sido observadas em micrografias das células preparadas para microscopia eletrônica de transmissão (MET). Nosso interesse é: i) caracterizar os mecanismos de captação de colesterol, mediados por receptores ou não; ii) averiguar se a taxa de captação de LDL (colesterol) influencia na viabilidade do parasito; iii) realizar ensaios de captação de LDL purificada, estabelecendo uma relação associada à concentração, tempo e toxicidade: iv) ensaios de binding; v) acompanhar o tráfego para outros compartimentos por meio de traçadores específicos para microscopia ótica e de transmissão (MET). Devido à pandemia, as atividades laboratoriais foram reduzidas. Até o momento, realizamos ensaios de captação de LDL isolada em diferentes tempos e sob duas concentrações distintas: 300 e 500 µg/mL mantendo as células em meio definido com soro fetal bovino delipidado. Ensaios de fluorescência usando BODIPY 495/503 (fluoróforo que se acumula em compartimentos ricos em moléculas hidrofóbicas) mostraram o acúmulo de lipídios de acordo com a concentração de LDL e do tempo de cultivo. Os ensaios de MET após a endocitose de LDL para observação do parasito em cortes ultrafinos estão em andamento. Goldstein, J.L; Brown, M.S. Binding and Degradation of Low Density Lipoproteins by Cultured Human Fibroblasts. Comparison of Cells From a Normal Subject and From a Patient With Homozygous Familial Hypercholesterolemia (1974). J Biol Chem;249(16):5153-62. Pereira, M.G.; Alcantara, C.L. Aspectos Celulares dos epimastigotas de Trypanosoma cruzi (Kinetoplastida, Trypanosomatidae) – Captação e armazenamento de macromoléculas. In: Meneghetti, D.U.O; Oliveira, J.; Camargo, L.M.A (org). Atualidades em Medicina Tropical no Brasil: Protozoários. Rio Branco, Stricto Sensu, Cap. 2, p.29-47, 2020. Schneider, WJ; Beisiegel, U; Goldstein, JL; Brown, MS. Purification of the Low Density Lipoprotein Receptor, an Acidic Glycoprotein of 164,000 Molecular Weight (1982). J Biol Chem.257(5):2664-73.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital
DOI

Como citar

SILVA, Lívia Daflon da; PEREIRA, Miria Gomes; SILVA, NARCISA LEAL DA CUNHA E. CARACTERIZAÇÃO DOS MECANISMOS DE ENTRADA DE ESTERÓIS EM TRYPANOSOMA CRUZI.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/318466-CARACTERIZACAO-DOS-MECANISMOS-DE-ENTRADA-DE-ESTEROIS-EM-TRYPANOSOMA-CRUZI. Acesso em: 16/07/2025