DETECÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE BACTERIOCINAS (DIFFOCINAS) EM RIBOTIPOS DE CLOSTRIDIOIDES DIFFICILE

Andressa Rosário de Azevedo; Regina Maria Cavalcanti Pilotto Domingues; Felipe Miceli de Farias; Eliane de Oliveira Ferreira

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Trabalho

Título do Trabalho

DETECÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE BACTERIOCINAS (DIFFOCINAS) EM RIBOTIPOS DE CLOSTRIDIOIDES DIFFICILE

Autores

Andressa Rosário de Azevedo
Regina Maria Cavalcanti Pilotto Domingues
Felipe Miceli de Farias
Eliane de Oliveira Ferreira

Modalidade

Resumo apresentação oral curta

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Microbiologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/318443-deteccao-e-caracterizacao-de-bacteriocinas-(diffocinas)-em-ribotipos-de-clostridioides-difficile

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Clostridioides difficile, Bacteriocina, Diffocina

Resumo

Clostridioides difficile é um bastonete anaeróbio, gram-positivo, formador de esporos e causador da colite pseudomembranosa associada ao uso de antimicrobianos e mega cólon tóxico. As infecções por C. difficile (CDI) estão relacionadas ao uso de antibióticos, que leva a um estado de disbiose intestinal. As cepas virulentas produzem as toxinas responsáveis pelo processo infeccioso, TcdA e TcdB. Algumas também produzem uma terceira toxina, a binária (CDT). Com a pandemia de COVID-19, o uso de antibióticos de amplo espectro aumentou bastante para prevenir as infecções bacterianas nos pacientes internados, e isto pode levar ao aumento do número de casos de CDI no mundo. Em 2011, foram estimados cerca de 453mil casos da doença, com 29,3mil mortes nos Estados Unidos. Este aumento da incidência e mortalidade da CDI foram amplamente atribuídas à cepa epidêmica NAP1/BI do ribotipo 027, que é multirresistente, tem altas taxas de esporulação e produção de toxinas. Além disso, acredita-se que hoje há cerca de 900 ribotipos; dentre eles, RT 133, RT 135 e RT 106, como os mais comuns no Brasil. Para o tratamento da doença, usa-se dois antimicrobianos, metronidazol e vancomicina, e também o restabelecimento da microbiota intestinal com o uso de probióticos. Devido ao grande impacto causado pelo C. difficile até os dias de hoje, vários tratamentos alternativos vêm sendo sugeridos, como novos fármacos e o transplante fecal. E, estudos anteriores apontam a existência de bacteriocinas (diffocinas) que conseguem atuar na morte celular de alguns ribotipos de C. difficile. Portanto, o objetivo do trabalho é detectar e caracterizar as diffocinas produzidas por alguns ribotipos de C. difficile pertencentes a coleção de cultura do laboratório Biologia de Anaeróbios/IMPG/UFRJ e, avaliar o seu efeito nos diferentes ribotipos. Para isto, cerca de 200 cepas serão reativadas em meio BHI-PRAS e semeadas em ágar sangue suplementado para obtenção de colônias puras. Para obter as diffocinas, as cepas serão cultivadas em meio líquido Brucella até alcançarem a D.O.600 de 0,3, e o antimicrobiano Mitomicina C (4?g/mL) será adicionado para a indução do sistema SOS de reparo do DNA. As cepas serão incubadas a 37 oC por 24h em anaerobiose e, o sobrenadante da cultura obtido por centrifugação. Este sobrenadante será ultra centrifugado e o sedimento será ressuspendido no tampão contendo 10mM Tris-HCl e 50mM NaCl. Para o teste da atividade das diffocinas, o método de spot, frente as cepas de C. difficile será utilizado. Caso seja detectada a atividade, serão utilizados métodos analíticos seguidos da identificação por espectrometria de massas para isolar e identificar as diffocinas. Algumas bacteriocinas já são conhecidas e apresentam uma grande importância na indústria alimentícia para o controle do crescimento bacteriano. Então, o uso de uma bacteriocina específica para C. difficile pode ser uma promissora medida profilática, visando evitar a colonização dos pacientes hospitalizados. Suporte financeiro: FAPERJ e CNPq REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS 1- BISHOP-LILLY, K. A., BUTANI, A., GEBHART, D., GOVONI, G. R., SCHOLL, D., WILLIAMS, S. R., … & WILLNER, K. M. (2012). Novel high-molecular-weight, R-type bacteriocins of Clostridium difficile. Journal of bacteriology, 194(22), 6240-6247. 2- SCHOLL, D. (2017). Phage tail–like bacteriocins. Annual review of virology, 4, 453-467. 3- SPIGAGLIA, P. (2020). COVID-19 and Clostridioides difficile infection (CDI): Possible implications for elderly patients. Anaerobe 64 (2020) 102233.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

AZEVEDO, Andressa Rosário de et al.. DETECÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE BACTERIOCINAS (DIFFOCINAS) EM RIBOTIPOS DE CLOSTRIDIOIDES DIFFICILE.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/318443-DETECCAO-E-CARACTERIZACAO-DE-BACTERIOCINAS-(DIFFOCINAS)-EM-RIBOTIPOS-DE-CLOSTRIDIOIDES-DIFFICILE. Acesso em: 04/07/2025