ESTUDO DO PAPEL DE LACTATO NA ATIVAÇÃO E DIFERENCIAÇÃO DE LINFÓCITOS TCD8+

Bianca Braga Frade; Carolina Calôba Oliveira de Mattos Cruz; Matheus Melo do Carmo; Ana Carolina Oliveira; MIRIAM BIANCHI DE FRONTIN WERNECK

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Trabalho

Título do Trabalho

ESTUDO DO PAPEL DE LACTATO NA ATIVAÇÃO E DIFERENCIAÇÃO DE LINFÓCITOS TCD8+

Autores

Bianca Braga Frade
Carolina Calôba Oliveira de Mattos Cruz
Matheus Melo do Carmo
Ana Carolina Oliveira
MIRIAM BIANCHI DE FRONTIN WERNECK

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Imunologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/318034-estudo-do-papel-de-lactato-na-ativacao-e-diferenciacao-de-linfocitos-tcd8

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Imunologia, Câncer, Lactato, Metabolismo

Resumo

Os linfócitos TCD8, agrupados em células naive, efetoras ou de memória, possuem papel essencial no combate tumoral. Falha na imunovigilância realizada por essas células pode levar à progressão do câncer (FINN, J. O., 2018), favorecendo a formação de um microambiente tumoral que retroalimenta a célula transformada. Dentre os fatores capazes de inibir a atividade de linfócitos T citotóxicos está o lactato, produzido e secretado por células tumorais que realizam glicólise majoritariamente, o Efeito Warburg (HOUSE, S. W, 1956). Além de servir para o processo anabólico nas células transformadas, ele atenua funções de células T citotóxicas infiltrantes do tumor (FISCHER, K, 2007). Porém, o impacto deste metabólito na capacidade de ativação e diferenciação de células TCD8 naive ainda não foi avaliado. Com esta finalidade, células TCD8+ CD44- (naive) de linfonodos de camundongos C57BL/6 foram isoladas por sorteamento em citômetro de fluxo (FACS). Estas foram ativadas com a-CD3 e a-CD28 em poços recobertos por a-IgG na presença de IL-12, acrescentando IL-2 a partir do 2º dia, durante 5 dias, para geração de células efetoras. Para a geração de células de memória foram adicionadas IL-7 e IL-15 no dia 0; IL-2 foi acrescentada a partir do 2º dia; do dia 4 em diante adicionamos apenas IL-2 e IL-15 e acompanhamos até o dia 10. Análises fenotípicas confirmando os fenótipos foram feitas por FACS marcando as células com a-CD44, a-CD8, a-CD25 e a-CD62L. Avaliamos, então, a expressão de genes-chave na definição metabólica destas células (Hk2, Pkm1, Pkm2, Mct1 e Mct4) ao longo e após a diferenciação celular por PCR em tempo real, observando o impacto de lactato e ácido láctico na expressão dos genes de interesse. Apesar de células de memória tenderem a expressar mais Mct1 e Mct4 em comparação às efetoras, tratamento com lactato não altera a expressão dos genes investigados. Análise global através RNA-seq e bioinformática comparando células de memória e efetoras feita posteriormente confirmaram os perfis de diferenciação e identificaram o aumento na expressão de genes interessantes em células de memória, como Cmah, Ogt e Slc16a1. Para análise funcional, fizemos ensaio in vivo de crescimento tumoral utilizando células B16-OVA inoculadas subcutaneamente no flanco de animais C57Bl/6, com posterior transferência de linfócitos OT-I efetores ou de memória por via endovenosa. Observamos uma tendência de menor tamanho de tumor e maior sobrevivência nos animais que receberam células efetoras e de memória não tratadas. Ainda, fizemos ensaio de infecção intraperitoneal por T. cruzi y-OVA. Apesar de ser um dado inicial, observamos um maior parasitismo no dia 7 de infecção nos animais que receberam células efetoras tratadas com lactato. Concluímos então que células de memória e efetoras têm alterações metabólicas que merecem maior investigação, e que tratamento com lactato prejudica a atividade destas células na resposta anti-tumoral e em resposta à infecção, pendente repetição. Referências: FINN, J. O.., A believer’s overview of cancer immunosurveillance and immunotherapy, The Journal of Immunology, 2018, v. 200, p. 385-391. FISCHER, K.. Inhibitory effect of tumor cell-derived lactic acid on human T cells, Blood, 2007, v. 109, p. 3812–3819. HOUSE, S. W.. On respiratory impairment in cancer cells, American Association for the Advancement of Science, 1956, v. 124, n. 3215, p. 267-272.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

FRADE, Bianca Braga et al.. ESTUDO DO PAPEL DE LACTATO NA ATIVAÇÃO E DIFERENCIAÇÃO DE LINFÓCITOS TCD8+.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/318034-ESTUDO-DO-PAPEL-DE-LACTATO-NA-ATIVACAO-E-DIFERENCIACAO-DE-LINFOCITOS-TCD8. Acesso em: 02/05/2025