AÇÃO DOS HORMÔNIOS TIREOIDIANOS (HT) NO FÍGADO E ESTRESSE DE RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO (RE)

Hellen Marianne de Oliveira Costa; WAGNER SEIXAS DA SILVA

Todos os Trabalhos

Trabalho

Título do Trabalho

AÇÃO DOS HORMÔNIOS TIREOIDIANOS (HT) NO FÍGADO E ESTRESSE DE RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO (RE)

Autores

Hellen Marianne de Oliveira Costa
WAGNER SEIXAS DA SILVA

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Bioquímica

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/317930-acao-dos-hormonios-tireoidianos-(ht)-no-figado-e-estresse-de-reticulo-endoplasmatico-(re)

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

tapsigargina, estresse de retículo endoplasmático, hormônios tireoidianos, células HepG2

Resumo

Os hormônios tireoidianos (HTs) medeiam relevantes ações fisiológicos, como desenvolvimento, crescimento e metabolismo energético (Arrojo et al., 2013; Mullur et al., 2014). O retículo endoplasmático (RE), organela celular complexa e adaptável, é envolvida em processos críticos, como: síntese e enovelamento de proteínas, biossíntese lipídica e homeostase de cálcio (Schröder M., 2008). Quando há uma sobrecarga de suas funções, ocorre a ativação da resposta à proteínas mal enoveladas. Diversos estudos mostram que várias condições metabólicas intimamente associadas à sinalização dos HTs são agravadas pelo estresse de RE, como obesidade e resistência à insulina. Logo, o objetivo do presente estudo foi investigar a relação entre o estresse de RE, induzido por tapsigargina, e o metabolismo de HTs. Para isso, utilizamos a linhagem celular de hepatocarcinona humano, HepG2, para avaliar a expressão dos marcadores do estresse de RE como BiP, CHOP, Ire1a e XBP1 (total) e, posteriormente, da enzima conversora do HT a sua forma ativa T3, deiodinase 1 (Dio1) e do gene regulado por T3, SPOT14. As células HepG2 foram mantidas em DMEM contendo 25 mM de glicose, suplementado com 10% de soro fetal bovino (FBS), em uma atmosfera de 5% de CO2 a 37°C. Para os procedimentos experimentais as células foram plaqueadas em placas de 6 poços em uma densidade de 1x105células/mL por um período de 48 horas. Em seguida foram tratadas na condição experimental: DMEM + 4 µM de tapsigargina, por 24 horas. O grupo controle foi incubado com DMEM adicionado ao veículo DMSO pelo mesmo período de tempo. Após o tratamento a extração do RNAm das células HepG2 foi realizada utilizando o Tri Reagent e a concentração de RNAm foi determinada a 260 nm usando o espectrofotômetro NanoDrop. A transcrição reversa foi executada com o High-CapacitycDNA Reverse Transcription Kit e, por fim, observou-se a expressão do RNAm dos genes BiP, CHOP, IRE1a, XBP1t, SPOT14 e Dio1, através da técnica de RT-PCR, utilizando primers específicos. As médias e o erro padrão da média de três poços de cultivo distintos de um mesmo experimento foram calculados e comparadas via teste t de student não pareado, sendo consideradas significativas quando p < 0,05. Os resultados preliminares sugerem que o tratamento com tapsigargina não altera significativamente a expressão de BiP (p= 0,3), CHOP (p= 0,7), IRE1a (p= 0,2) e eleva, significativamente, a expressão de XBP1spliced (p= 0,0041). O tratamento não alterou a expressão de SPOT14, porém reduziu a expressão de Dio1 (p= 0,01). Conclui-se que a tapsigargina foi capaz de induzir o estresse de retículo, confirmado pelo aumento significativo da ativação de XBP1 e diminuir a expressão da enzima Dio1, mas não da proteína responsiva aos HT - SPOT14, sendo um resultado inédito, em HepG2. Sendo assim, é necessária maior investigação dos efeitos do estresse do retículo no metabolismo e ação dos hormônios tireoidianos e, para isso, buscar avaliar as alterações em condições experimentais que mimetizem o estresse de retículo observado nas fisiopatologias. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS Arrojo, E.D.R. et al. Role of the type 2 iodothyronine deiodinase (D2) in the control of thyroid hormone signaling. Biochimica et Biophysica Acta, 2013, v. 1830, n. 7, p. 3956–64; Mullur, R. et al. Thyroid hormone regulation of metabolism. Physiological Reviews, 2014, v. 94, n. 2, p. 355–82 ; Schröder M. Endoplasmic reticulum stress responses. Cellular and Molecular Life Sciences, 2008, v. 65, n. 6, p. 862-94.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

COSTA, Hellen Marianne de Oliveira; SILVA, WAGNER SEIXAS DA. AÇÃO DOS HORMÔNIOS TIREOIDIANOS (HT) NO FÍGADO E ESTRESSE DE RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO (RE).. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/317930-ACAO-DOS-HORMONIOS-TIREOIDIANOS-(HT)-NO-FIGADO-E-ESTRESSE-DE-RETICULO-ENDOPLASMATICO-(RE). Acesso em: 12/07/2025