Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural

VESÍCULAS DE MEMBRANA: UMA ROTA NEGLIGENCIADA PARA DISSEMINAÇÃO DE RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA NO MEIO AMBIENTE?

Publicado em 22/03/2021 - ISBN: 978-65-5941-128-3

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Título do Trabalho

VESÍCULAS DE MEMBRANA: UMA ROTA NEGLIGENCIADA PARA DISSEMINAÇÃO DE RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA NO MEIO AMBIENTE?

Autores

Stefanie Camargo da Costa
Renata Cristina Picão

Modalidade

Resumo apresentação oral curta

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Microbiologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/317119-vesiculas-de-membrana--uma-rota-negligenciada-para-disseminacao-de-resistencia-antimicrobiana-no-meio-ambiente

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

vesículas de membrana extracelular, RAMs, GRAs

Resumo

A disseminação da resistência aos antimicrobianos (RAMs) aumenta a morbidade e letalidade das infecções, dificultando seu tratamento. Em espécies de bactérias gram-negativas a propagação desses genes tem afetado a eficácia de muitos antimicrobianos, incluindo aqueles de última escolha. RAM emergiu nas instituições de saúde, mas as bactérias resistentes não estão restritas a esses ambientes (O’Neill 2014, WHO 2017ª). Tal disseminação pode ter consequências para a saúde humana e animal e, portanto, merece maior investigação. A capacidade de adquirir genes de resistência aos antimicrobianos (GRAs) se deve a três principais mecanismos: conjugação, transdução e transformação. Porém, recentemente, foi descrita a aquisição de GRAs mediada por vesículas extracelulares (VEs). Estas estruturas são constituídas a partir da membrana externa ou da membrana interna junto a externa, e podem empacotar uma ampla gama de moléculas do periplasma ou citoplasma bacterianos (Kulp & Kuehn 2010, Toyofuco et al. 2015). Embora alguns estudos tenham confirmado a atuação de VEs na transferência de GRAs em condições laboratoriais (Ciofu et al. 2000, Schaar et al., 2011, Devos et al., 2015), seu papel em um ambiente aquático ainda é inexplorado. Nossa hipótese é a de que o transporte vesicular é um mecanismo importante para a transferência de GRA no meio aquático, tendo em vista a capacidade de entrega, ainda que não haja contato próximo entre doadores e receptores. O objetivo do presente trabalho é avaliar se VEs extraídas do ambiente aquático são transmissoras de RAM. Três alíquotas (30 L) de água superficial serão coletadas em pontos da Baía de Guanabara, Rio de Janeiro, Brasil local notório pelo alto nível de contaminação onde estudos prévios do laboratório já isolaram diversas cepas multirresistentes. A extração de VEs será realizada por filtragens sucessivas até filtros de 0,22 micrômetros e subsmissão do filtrado ao Amikon empregando um filtro de 100kDa. A fração retida nesta etapa será ultracentrifugada e o pellet será ressuspendido em PBS. O material será visualizado por meio de microscopia eletrônica de transmissão (MET) e a análise do tamanho da população de vesículas será realizada por espalhamento dinâmico de luz (EDL). Além disso, a quantificação de proteínas e pesquisa da atividade de beta-lactamase em VMs serão realizadas usando o Kit de Ensaio de Proteína Pierce BCA e com uso de Nitrocefin, respectivamente. Então, as vesículas serão incubadas com culturas de enterobactérias, Pseudomonas e Acinetobacter, sabidamente sensíveis aos antimicrobianos, seguida pela seleção de possíveis transformantes empregando pressão seletiva por antibióticos relevantes para o tratamento de infecções pelos microrganismos receptores. Este estudo é exploratório e busca mostrar relevância de VEs na troca e perpetuação de GRAs no meio ambiente podendo apontar, no longo prazo, medidas de intervenção mais eficazes para reduzir a propagação destes genes em ambientes aquáticos. Referências bibliográ?cas: Ciofu, et al. 2000. Chromosomal beta-lactamase is packaged into membrane vesicles and secreted from Pseudomonas aeruginosa. J. Antimicrob. Chemother. 45, 9–13. Kulp & Kuehn 2010. Biological functions and biogenesis of secreted bacterial outer membrane vesicles. Annu Rev Microbiol 64:163-84. O’Neill 2014. Antimicrobial resistance: tackling a crisis for the health and wealth of nations. Rev Antimicrob Resist. http://RAM-review.org/Publications.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

COSTA, Stefanie Camargo da; PICÃO, Renata Cristina. VESÍCULAS DE MEMBRANA: UMA ROTA NEGLIGENCIADA PARA DISSEMINAÇÃO DE RESISTÊNCIA ANTIMICROBIANA NO MEIO AMBIENTE?.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/317119-VESICULAS-DE-MEMBRANA--UMA-ROTA-NEGLIGENCIADA-PARA-DISSEMINACAO-DE-RESISTENCIA-ANTIMICROBIANA-NO-MEIO-AMBIENTE. Acesso em: 06/05/2025

Trabalho