PADRONIZAÇÃO DA FABRICAÇÃO DE ESFEROIDES TUMORAIS ATRAVÉS DA AUTOMATIZAÇÃO

Úrsula de Almeida Kopke; Guilherme de Almeida Santos de Castro e Miranda; Leandra Santos Baptista

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Trabalho

Título do Trabalho

PADRONIZAÇÃO DA FABRICAÇÃO DE ESFEROIDES TUMORAIS ATRAVÉS DA AUTOMATIZAÇÃO

Autores

Úrsula de Almeida Kopke
Guilherme de Almeida Santos de Castro e Miranda
Leandra Santos Baptista

Modalidade

Resumo apresentação oral curta

Área temática

Campus Duque de Caxias/Biotecnologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/317008-padronizacao-da-fabricacao-de-esferoides-tumorais-atraves-da-automatizacao

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Cultivo 3D, Câncer, Esferoides tumorais, Padronização, Automatização

Resumo

O câncer é a segunda doença que mais mata no mundo, de acordo com a Organização Mundial da Saúde. No Brasil, o Instituto Nacional do Câncer (INCA, 2020) estima quase 380.000 novos casos até o fim de 2020, principalmente em decorrência do aumento da expectativa de vida da população e aos hábitos alimentares precários. Diante deste cenário, torna-se fundamental encontrar formas mais eficazes de se mimetizar os tumores e o seu microambiente in vitro (Gong et al, 2015). Entretanto, o método de cultivo em monocamada (2D) não consegue reproduzir de maneira genuína toda a complexidade tumoral. Por outro lado, o cultivo de esferoides (3D) promove o contato célula-célula e célula-matriz de maneira muito mais fidedigna, essas interações favorecem o microambiente tumoral, fator crucial para que os resultados in vitro sejam mais semelhantes aos encontrados in vivo (Min et al, 2008). Porém, uma das grandes limitações da produção dos esferoides tumorais reside na sua padronização e automatização. Sendo assim, o objetivo desse estudo é utilizar a tecnologia de automatização com o intuito de padronizar e escalonar a produção de esferoides tumorais. Os esferoides tumorais utilizados no estudo são provenientes das linhagens de MCF-7, HEPG-2, MG-63 e SAOS 2 e foram plaqueados em 3 concentrações celulares distintas (1 x 105, 5 x 105 e 1 x 106 células). Os esferoides foram produzidos pelo robô de pipetagem automática Epmotion 5070 (Eppendorf). O plaqueamento das células foi realizado em hidrogéis de agarose micromoldados com 81 ressecções (Sigma). Utilizou-se o meio DMEM com adição de albumina (2,5mg/ml), ácido ascórbico (10-2M), PS (Penicilina e Estreptomicina) e ITS (Insulina , Transferrina e Selênio). As culturas 3D foram acompanhadas de 0h até 7 dias e foi realizada a mediação através do microscópio óptico Invertido (Zeiss, Software Zen 3.5). Posteriormente, foi realizado o processamento histológico e coloração de Hematoxilina e Eosina. Os resultados da padronização do plaqueamento automatizado demonstraram que o robô não gerou perda de qualidade em relação ao plaqueamento manual. Além disso, resultados preliminares indicaram que a concentração celular ideal e o tempo de compactação estão intimamente ligados a cada linhagem tumoral. Análises morfológicas revelaram que os esferoides de HEPG-2 apresentavam morfologia mais heterogênea em relação aos esferoides de MCF-7 e MG-63. As linhagens de MCF-7 e MG-63 apresentaram melhor compactação ao final de 7 dias. A linhagem que apresentou compactação menos eficiente foi a SAOS-2. São necessários mais testes para identificar o melhor tempo de compactação e número celular ideal de cada linhagem. Referências: Instituto Nacional do Câncer (INCA). GONG, Xue et al. Generation of multicellular tumor spheroids with microwell-based agarose scaffolds for drug testing. PloS one, 2015. HU, Min; POLYAK, Kornelia. Molecular characterisation of the tumour microenvironment in breast cancer. European journal of cancer, 2008.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

KOPKE, Úrsula de Almeida; MIRANDA, Guilherme de Almeida Santos de Castro e; BAPTISTA, Leandra Santos. PADRONIZAÇÃO DA FABRICAÇÃO DE ESFEROIDES TUMORAIS ATRAVÉS DA AUTOMATIZAÇÃO.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/317008-PADRONIZACAO-DA-FABRICACAO-DE-ESFEROIDES-TUMORAIS-ATRAVES-DA-AUTOMATIZACAO. Acesso em: 19/06/2025