UTILIZAÇÃO DA TÉCNICA DE FISH COMO FERRAMENTA PARA ANÁLISE DA BIOMASSA ADERIDA EM SISTEMAS NITRIFICANTES

Jasmim Muniz Rodrigues Dias; Renato Rocha Valério; João Paulo Bassin; Isabelli Dias Bassin

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Trabalho

Título do Trabalho

UTILIZAÇÃO DA TÉCNICA DE FISH COMO FERRAMENTA PARA ANÁLISE DA BIOMASSA ADERIDA EM SISTEMAS NITRIFICANTES

Autores

Jasmim Muniz Rodrigues Dias
Renato Rocha Valério
João Paulo Bassin
Isabelli Dias Bassin

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Tecnologia (CT)/Engenharia Química

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/316854-utilizacao-da-tecnica-de-fish-como-ferramenta-para-analise-da-biomassa-aderida-em-sistemas-nitrificantes

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Biorreator, Microrganismos, Tratamento Biológico, FISH

Resumo

O tratamento biológico de efluentes vem sendo amplamente empregado devido à capacidade de uso de microrganismos para degradação de poluentes. A microfauna presente é responsável por manter o equilíbrio do ambiente, além de realizar a reciclagem e degradação natural dos nutrientes. Todavia, o número de microrganismos já identificados ainda é reduzido, havendo grande potencial para descobertas futuras. Técnicas de biologia molecular, como a técnica de FISH, que é baseada na hibridização in situ com fluorescência, são utilizadas para identificar, avaliar e quantificar as bactérias em sistemas de tratamento biológico. Nessa técnica, são usadas sondas específicas de DNA que irão hibridizar e reconhecer sequências características de rRNA, permitindo a identificação dos microrganismos. O objetivo deste trabalho foi identificar e quantificar as bactérias presentes em dois sistemas MBBR (reator de leito móvel com biofilme) nitrificantes, submetidos à altas cargas de amônia (14 a 22 g NH4 +-N/m².dia) através da técnica de FISH. Ambos biorreatores (R1 e R2) foram operados com tempo de retenção hidráulica de 3h e alimentados com o mesmo efluente sintético, com diferença apenas no tipo de suporte utilizado para crescimento do biofilme. Enquanto no R1 foi utilizado suporte não poroso Anox Kaldnes K1, de área superficial de 500 m²/m³, no R2 utilizou-se suporte poroso Mutag Biochip, com área superficial de 3000 m²/m³. Amostras de biofilme de ambos reatores foram extraídas em 3 regimes, correspondendo a carga de amônia de 14, 18, 22 g NH4 +-N/m².dia. O preparo das amostras, incluindo a fixação e hibridização, foi realizado seguindo protocolo elaborado em estudo anterior (Dias, et. al, 2019) baseado nos protocolos já existentes (Pernthaler, et al., 2001). As sondas usadas para coloração foram EUB, geral para eubactérias, sonda específica para BOA (bactérias oxidadoras de amônia) e BON (bactérias oxidadoras de nitrito). As amostras preparadas foram analisadas em microscópio Confocal Zeiss LSM 710 e o programa Python foi utilizado como software para essa quantificação. A análise mostrou que a relação BON/BOA para R1 foi de 22, 36 e 19% enquanto para o R2 foi de 14, 31 e 46% para os 3 regimes, respectivamente. Observou-se uma maior quantidade de BOA em detrimento às BON em todas as situações. Com o incremento da carga pode-se verificar o aumento da comunidade de BON no R2, entretanto, esses microrganismos apresentaram maior sensibilidade no R1, com decréscimo da quantidade na carga mais elevada, o que ocasionou uma nitrificação parcial com acúmulo de nitrito no reator. O perfil distinto da relação observado nos sistemas pode estar associado aos suportes e a diferença na forma do crescimento do biofilme em cada um deles. O uso da técnica de FISH foi importante para a interpretação dos resultados das análises físico-químicas dos sistemas analisados, mostrando a importância da aplicação da biologia molecular nos estudos de tratamento biológico de efluentes. Referências: PERNTHALER, J., GLÖCKNER F. O., SCHÖNHUBER W. & AMANN R. Fluorescence in situ hybridization. In J. Paul (ed.), Methods in Microbiology: Marine Microbiology, vol. 30, Academic Press Ltd, London, 2001. DIAS, Jasmim Muniz Rodrigues; BASSIN, Isabelli; BASSIN, João Paulo. Análise da comunidade microbiana presente em sistemas biológicos para tratamento de efluentes através da técnica de FISH. 10ª Semana de Integração Acadêmica da UFRJ, 21 a 27 de Outubro de 2019.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

DIAS, Jasmim Muniz Rodrigues et al.. UTILIZAÇÃO DA TÉCNICA DE FISH COMO FERRAMENTA PARA ANÁLISE DA BIOMASSA ADERIDA EM SISTEMAS NITRIFICANTES.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/316854-UTILIZACAO-DA-TECNICA-DE-FISH-COMO-FERRAMENTA-PARA-ANALISE-DA-BIOMASSA-ADERIDA-EM-SISTEMAS-NITRIFICANTES. Acesso em: 13/09/2025