PLASTICIDADE MORFOLÓGICA INDUZIDA POR NUCLEOTÍDEOS CÍCLICOS: PAPEL DOS CANAIS CNG E DA FOSFODIESTERASE 2

Mariana de Oliveira Omena; Newton Gonçalves de Castro

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Trabalho

Título do Trabalho

PLASTICIDADE MORFOLÓGICA INDUZIDA POR NUCLEOTÍDEOS CÍCLICOS: PAPEL DOS CANAIS CNG E DA FOSFODIESTERASE 2

Autores

Mariana de Oliveira Omena
Newton Gonçalves de Castro

Modalidade

Resumo apresentação oral curta

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Farmacologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/316847-plasticidade-morfologica-induzida-por-nucleotideos-ciclicos--papel-dos-canais-cng-e-da-fosfodiesterase-2

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Células adrenocorticais, Nucleotídeos Cíclicos, Fosfodiesterases

Resumo

A fosfodiesterase do tipo 2 (PDE2) faz parte de um grupo de enzimas que hidrolisam AMPc e/ou GMPc. É também regulada pelas concentrações desses nucleotídeos cíclicos, que podem estimular ou inibir a enzima. A PDE2 é importante na sinalização celular, principalmente no SNC, onde tem expressão significativa em regiões como o bulbo olfatório e o córtex, e em alguns tipos celulares fora do sistema nervoso como hepatócitos e células adrenocorticais (Mehats et al., 2002). As células adrenocorticais são particularmente ricas em PDE2, que nelas modula a esteroidogênese e alterações do citoesqueleto via AMPc e GMPc, induzidas pelo ACTH, ou por ativação direta da adenilato ciclase (AC) com forscolina (Schimmer e Schulz,1985). Esse fenômeno gera a desfosforilação da paxilina e a fosforilação de proteínas como a caveolina e a vimentina, resultando na reorganização do citoesqueleto. Já em células cardíacas, a PDE2 é importante na modulação de canais iônicos ativados por nucleotídeos (CNG), os quais são canais excitatórios permeáveis a cátions monovalentes e divalentes. Sabendo que os canais CNG já foram implicados em plasticidade funcional e morfológica de neurônios, nos perguntamos se esses canais também são alvos dos nucleotídeos em células adrenocorticais, modulando sua função e a resposta aos estímulos esteroidogênicos, incluindo as alterações morfológicas. Nesse trabalho, foi selecionada a linhagem de células Y1, derivadas de um tumor de córtex adrenal de camundongo. Primeiramente, objetivamos caracterizar a resposta morfológica das células ao aumento do AMPc. Desse modo, fez-se um ensaio da forscolina, uma substância que estimula diretamente a adenilil ciclase. Desse modo, foi realizado um plaqueamento de células em três concentrações diferentes, e elas foram submetidas a cinco concentrações diferentes de forscolina. Após uma hora de incubação, foi verificado um arredondamento expressivo das células. Nesse sentido, fizemos a média das porcentagens de células arredondadas, para cada concentração de forscolina (em µM), analisando a significância estatística por ANOVA. Na condição basal (controle), 53,0 ± 5,6% das células se encontravam arredondadas, enquanto as demais tinham morfologia plana e poligonal (média ± DP, n = 3). Forscolina 3 µM induziu 100% de arredondamento. O ensaio forneceu uma EC50 de 0,099 µM, mostrando a potência do agonista, que induz o aumento de AMPc e gerou o arredondamento. Com esse resultado, confirmou-se a sensibilidade do nosso clone das células Y1 ao aumento do AMPc. Após isso, iniciamos ensaios de eletrofisiologia para padronizar o registro de correntes iônicas mediadas por CNG em cultura de astrócitos, como padrão de referência (Podda et al., 2012). Após esses resultados, repetiremos esse ensaio com as células Y1, descreveremos as suas características e estudaremos sua modulação pela atividade da PDE2. Estes experimentos servirão de molde para um estudo da interação entre CNG e PDE2 em fenômenos de plasticidade neural. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS MEHATS, C.; et al. Cyclic nucleotide phosphodiesterases and their role in endocrine cell signaling. Trends Endocrinol Metab, 2012. v. 13, p. 29-35. PODDA, M. V. et al. Expression of olfactory-type cyclic nucleotide-gated channels in rat cortical astrocytes. Glia 2012. v. 60, p. 1391-405. SCHIMMER, B. P.; SCHULZ, P. The roles of cAMP and cAMP-dependent protein kinase in forskolin's actions on Y1 adrenocortical tumor cells. Endocr Res, 1985. v. 11, p. 199-209.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

OMENA, Mariana de Oliveira; CASTRO , Newton Gonçalves de Castro . PLASTICIDADE MORFOLÓGICA INDUZIDA POR NUCLEOTÍDEOS CÍCLICOS: PAPEL DOS CANAIS CNG E DA FOSFODIESTERASE 2.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/316847-PLASTICIDADE-MORFOLOGICA-INDUZIDA-POR-NUCLEOTIDEOS-CICLICOS--PAPEL-DOS-CANAIS-CNG-E-DA-FOSFODIESTERASE-2. Acesso em: 29/06/2025