ISOLAMENTO E CARACTERIZAÇÃO DE CÉLULAS B ESPECÍFICAS CONTRA BACTÉRIAS GRAM-NEGATIVAS DE RELEVÂNCIA CLÍNICA PARA CLONAGEM DE ANTICORPOS NEUTRALIZANTES.

Caroline Albuquerque Rotilho dos Santos; Lucas Souza da Silva; Thaynara Oliveira da Silva; Priolsen

Título do Trabalho

Autores

Caroline Albuquerque Rotilho dos Santos
Lucas Souza da Silva
Thaynara Oliveira da Silva
Priolsen

Modalidade

Resumo apresentação oral curta

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Imunologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/316723-isolamento-e-caracterizacao-de-celulas-b-especificas-contra-bacterias-gram-negativas-de-relevancia-clinica-para-c

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Gram-negativas, Bombas de efluxo, Células B, Anticorpos neutralizantes.

Resumo

Introdução: O aumento das infecções causadas por bactérias resistentes a multidrogas (MDR) tem sido um problema de saúde pública no mundo todo nas últimas décadas. As bactérias têm desenvolvido diversos mecanismos de resistência aos antibióticos existentes no mercado, tornando a parede celular mais impermeável, modificando um componente bacteriano alvo do antimicrobiano, produzindo enzimas que inativam o antibiótico ou jogando ativamente a droga para fora da célula bacteriana por meio da superexpressão de bombas de efluxo. Em 2017 a Organização Mundial da Saúde (OMS) publicou uma lista de bactérias resistentes que necessitam de pesquisa e desenvolvimento de novos antibióticos com urgência. Nessa lista, as bactérias gram-negativas resistentes a múltiplas drogas, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa e várias Enterobacteriaceae encontram-se como prioridade crítica (Tacconelli et al., 2018). O frequente aparecimento de cepas resistentes, associada a sua rápida disseminação ameaça tornar inúteis os antibióticos existentes num futuro próximo e, o desenvolvimento de novos antimicrobianos não tem acompanhado essa demanda, pois poucos antibióticos foram aprovados nos últimos anos (López-Jácome et al., 2019). Objetivo: O objetivo do presente projeto é utilizar anticorpos monoclonais contra bombas de efluxo de bactérias gram-negativas de prioridade crítica para a OMS que sejam capazes de inibir infecções por Escherichia coli, P. aeruginosa, Klebsiella pneumoniae e/ou A. baumannii. A proteína TolC, que compõe a bomba de efluxo MacA–MacB–TolC, tem seu gene conservado em bactérias gram-negativas MDR e contribui para a virulência e resistência aos antibióticos (Fitzpatrick et al., 2017). Essas bombas são transmembranares e transportam toxinas, metabólitos, diversas moléculas e, claro, drogas também, direcionando essas substâncias do meio intracelular para o extracelular. A clonagem desses anticorpos se dará a partir de células B de memória específicas ao antígeno bacteriano alvo, no caso, a proteína TolC e suas homólogas, como a OprM, expressa na P. aeruginosa e a AbuO expressa em A. baumannii, todas localizadas na membrana externa. Metodologia: Induzir a produção de anticorpos anti-TolC através da imunização de camundongos BALB/c com a proteína TolC recombinante. Realizar ensaios ELISA para avaliar a afinidade da Ig do soro de camundongos imunizados à proteína TolC. Analisar a capacidade dos anticorpos anti-TolC de neutralizar as bactérias E. coli, P. aeruginosa, K. pneumoniae ou A. baumannii através do ensaio da atividade bactericida mediada por complemento e desafiando camundongos imunizados com a TolC com uma suspensão bacteriana intravenosa de E. coli, P. aeruginosa, K. pneumoniae ou A. baumannii. Resultados esperados: Ao final dos experimentos espera-se que os anticorpos identificados tenham alta afinidade à proteína de bomba de efluxo TolC e que esses anticorpos sejam capazes de neutralizar as bactérias gram-negativas de relevância clínica. Referências Bibliográficas: Tacconelli, E., Carrara, E., Savoldi, A., Harbarth, S., Mendelson, M., Monnet, D.L. et al. 2018. Discovery, research, and development of new antibiotics: the WHO priority list of antibiotic-resistant bacteria and tuberculosis. Lancet Infect Dis. 18:318-327. doi: 10.1016/S1473-3099(17)30753-3. López-Jácome, E., R. Franco-Cendejas, H. Quezada, R. Morales-Espinosa, I. Castillo-Juárez, B. González-Pedrajo et al. 2019. The race between drug introduction and appearance of microbial resistance. Current balance and alternative approaches. Curr Opin Pharmacol. 48:48–56. doi:10.1016/j.coph.2019.04.016. Fitzpatrick, A.W.P., S. Llabrés, A. Neuberger, J.N. Blaza, X.-C. Bai, U. Okada et al. 2017. Structure of the MacAB–TolC ABC-type tripartite multidrug efflux pump. Nature Microbiology. 2. doi:10.1038/nmicrobiol.2017.70.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

SANTOS, Caroline Albuquerque Rotilho dos et al.. ISOLAMENTO E CARACTERIZAÇÃO DE CÉLULAS B ESPECÍFICAS CONTRA BACTÉRIAS GRAM-NEGATIVAS DE RELEVÂNCIA CLÍNICA PARA CLONAGEM DE ANTICORPOS NEUTRALIZANTES... In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/316723-ISOLAMENTO-E-CARACTERIZACAO-DE-CELULAS-B-ESPECIFICAS-CONTRA-BACTERIAS-GRAM-NEGATIVAS-DE-RELEVANCIA-CLINICA-PARA-C. Acesso em: 02/08/2025