BRADICININA INIBE A ENDOCITOSE DE ALBUMINA MEDIADA POR MEGALINA EM CÉLULAS DO TÚBULO PROXIMAL: ENVOLVIMENTO DA VIA B2R/PKC

Sarah Aparecida dos Santos Alves; Lucas dos Santos Florentino; Diogo de Barros Peruchetti; Rodrigo Pacheco Silva-Aguiar; Douglas Esteves Teixeira; Maria Paz Marzolo; Caruso; Acacia

Título do Trabalho

Autores

Sarah Aparecida dos Santos Alves
Lucas dos Santos Florentino
Diogo de Barros Peruchetti
Rodrigo Pacheco Silva-Aguiar
Douglas Esteves Teixeira
Maria Paz Marzolo
Caruso
Acacia

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Fisiologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/316225-bradicinina-inibe-a-endocitose-de-albumina-mediada-por-megalina-em-celulas-do-tubulo-proximal--envolvimento-da-vi

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

túbulo proximal, endocitose, megalina, bradicinina

Resumo

INTRODUÇÃO: A reabsorção de proteínas no túbulo proximal, TP, é essencial para a homeostase de proteínas. Falhas neste processo promovem o desenvolvimento de proteinúria e consequentemente lesão tubulointersticial, contribuindo para a progressão da doença renal crônica. Dados prévios da literatura indicam que bradicinina (BK), peptídeo vasoativo do sistema calicreína-cinina, participa da progressão da doença renal (Lv et al. 2018). O efeito de BK na reabsorção de proteínas no TP, entretanto, ainda não foi estudado. OBJETIVO: Avaliar a possível participação de BK na endocitose de albumina em células de túbulo proximal (TP) e identificar o mecanismo molecular envolvido. MÉTODOS: Foram utilizadas células LLC-PK1, uma linhagem celular de TP. Quando indicado, células transfectadas expressando megalina com a porção extracelular truncada (mMeg-HA) foram utilizadas. A endocitose de albumina foi determinada por ensaio de captação de albumina-FITC e a expressão de proteínas de interesse foi determinada por immunoblotting e/ou imunofluorescência. RESULTADOS: Inicialmente, observamos que a co-incubação de BK com captopril, inibidor de ECA, enzima que degrada BK, reduziu a endocitose de albumina em 34% (n=9). Resultado semelhante foi observado por microscopia de fluorescência (40%) (n=3). Ao analisarmos a curva de dose-resposta, observou-se inibição da endocitose de albumina a partir de 100 pM (30%), e esse efeito foi mantido até 100 nM (42%). Em relação ao curso temporal, foi observado inibição a partir de 30 minutos até 12 horas de incubação (43%). Interessantemente, BK não alterou a expressão de megalina, receptor de albumina em células de TP, tanto endógena (n=2) quanto mMeg-HA (n=2). Entretanto, BK reduziu a expressão de mMeg-HA na superfície luminal (n=2), sugerindo que o efeito inibitório de BK envolve a internalização do receptor de albumina. A inibição da endocitose de albumina induzida por BK foi bloqueada na presença de HOE-140 100 nM (n=7), antagonista de B2R, mas não na presença de DALBK 100 nM (n=6), antagonista do receptor B1R. Adicionalmente, Lys-BK, agonista de B2R, mimetizou os efeitos de BK na endocitose de albumina (43% de inibição), enquanto Lys-DABK, agonista de B1R, não teve nenhum efeito (n=6). Esses dados sugerem que B2R medeia o efeito inibitório de BK. O pré-tratamento com calfostina C 10 nM, inibidor de proteína cinase C, PKC, bloqueou o efeito inibitório de BK na endocitose de albumina. PMA 1 pM, um conhecido ativador de PKC, mimetizou os efeitos de BK na endocitose de albumina (40% de inibição) (n=15). Além disso, BK aumentou a atividade da enzima de PKC em 30% (n=3). CONCLUSÃO: Observamos que BK inibe a endocitose de albumina no TP. O mecanismo molecular envolvido nesse processo envolve a ativação de B2R/PKC, que promove a redução de megalina na superfície da célula. Esses dados ajudam no esclarecimento sobre os efeitos de BK nas células do TP durante condições fisiológicas e patológicas. Referências Bibliográficas Lv W, et al. Inflammation and renal fibrosis: Recent developments on key signaling molecules as potential therapeutic targets. Eur J Pharmacol. 2018 Feb 5;820:65-76

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

ALVES, Sarah Aparecida dos Santos et al.. BRADICININA INIBE A ENDOCITOSE DE ALBUMINA MEDIADA POR MEGALINA EM CÉLULAS DO TÚBULO PROXIMAL: ENVOLVIMENTO DA VIA B2R/PKC.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/316225-BRADICININA-INIBE-A-ENDOCITOSE-DE-ALBUMINA-MEDIADA-POR-MEGALINA-EM-CELULAS-DO-TUBULO-PROXIMAL--ENVOLVIMENTO-DA-VI. Acesso em: 25/08/2025