MODULAÇÃO DE RHO GTPASES POR ESFINGOSINA 1-FOSFATO COMO PROPOSTA TERAPÊUTICA CONTRA DOENÇAS RENAIS: UMA NOVA GERAÇÃO DE BIOFÁRMACOS?

Fernanda Dias Nader; Glória Grelle; Rafael Ramos Hospodar Felippe Valverde; MARCELO EINICKER LAMAS

Título do Trabalho

Autores

Fernanda Dias Nader
Glória Grelle
Rafael Ramos Hospodar Felippe Valverde
MARCELO EINICKER LAMAS

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Biofísica

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/316074-modulacao-de-rho-gtpases-por-esfingosina-1-fosfato-como-proposta-terapeutica-contra-doencas-renais--uma-nova-gera

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Lesão Renal Aguda, Esfingosina 1-fosfato, Rho GTPases

Resumo

A lesão renal aguda (LRA) se caracteriza por uma diminuição súbita da função renal, constituindo-se em um problema grave de saúde pública. A lesão por isquemia e reperfusão é uma das principais causas da LRA (KINSEY et al., 2008). Esses processos podem ser mimetizados in vitro para, dessa maneira, auxiliarem no entendimento dos processos celulares envolvidos nesse evento. A esfingosina 1-fosfato (S1P) é um lipídio bioativo que possui importantes funções intra e extracelulares, destacando-se sua ação na proteção renal contra danos causados pela LRA (JO et al., 2008). Além disso, existem as proteínas pertencentes à família das Rho GTPses, como a RhoA, Rac1 e Cdc42,que estão envolvidas em diversos processos celulares de transdução de sinais, como regulação do citoesqueleto e adesão celular, o que faz com que coordenem eventos de migração e polaridade celular (HODGE & RIDLEY, 2016). Sendo assim, a pesquisa visa entender a relação entre essas três Rho GTPases e a S1P, a qual está relacionada a processos de sobrevivência celular . Os experimentos foram realizados com células HK-2 que foram cultivadas em meio K-SFM com 2% de soro fetal bovino (SFB). Com cerca de 90% de confluência, essas células foram submetidas a diferentes tratamentos, que foram realizados, ao todo, em 6 garrafas de cultura. Na condição 1, controle, foi usado somente K-SFM com 2% SFB. Na condição 2, as células foram tratadas com KSFM 2% SFB por 24h; K-SFM sem soro por 24h e o tampão isquêmico, composto por Antimicina A (AA), Deoxiglicose (DOG) e HBSS por 1h30. Na condição 3 foi feito tratamento com K-SFM 2% SFB por 24h; K-SFM sem soro por 24h e o HBSS por 1 hora e 30 minutos. As condições 4, 5 e 6 receberam o mesmo tratamento que as de n° 1, 2 e 3, respectivamente; entretanto, inicialmente foram tratadas por 1h com S1P após 24h de KSFM sem soro. Essas amostras foram homogeneizadas com tampão de lise e dosadas pelo método Folin-Fenol. Em seguida, foi feita a separação das proteínas por SDS-PAGE 10%, aplicando 40 µg de proteína por linha na eletroforese. O gel foi transferido para membranas de nitrocelulose e procedeu-se com ensaios de Western Blotting, feitos com anticorpos anti-RhoA, anti-Rac1, anti-Cdc42 e anti-ß-actina, como controle positivo. Os resultados mostraram aumento dos níveis de RhoA em células submetidas à depleção de ATP, bem como de Rac1 e Cdc42, que aumentaram cerca de 50% em comparação ao controle. Também fica evidente que existe uma maior disponibilidade de RhoA nas células pré-tratadas com S1P e mantidas em condição controle.O presente trabalho mostra que a S1P pode ter um papel importante na manutenção da polaridade das células renais, visto o efeito protetor nas alterações provocadas pela isquemia. Essa nova faceta desse importante lipídio bioativo aumenta a expectativa de sua utilização em alguma iniciativa futura na elaboração de um biofármaco para doenças renais e mesmo em pré-transplante renal. Suporte financeiro: CNPq , CAPES & FAPERJ. Referências Bibliográficas: HODGE, R.G; RIDLEY, A.J. Regulating Rho GTPases and their regulators. Nature Reviews Molecular Cell Biology, 2016, v. 17, n. 8, p. 496-510. JO, S.K; BAJWA, A; AWAD, A.S; LYNCH, K.R; OKUSA, M.D.Sphingosine 1-phosphate receptors: biology and therapeutic potential in kidney disease. Kidney International, 2008, v.73, n.11, p. 1220-1230. KINSEY, G.R; LI, L; OKUSA, M.D. Inflammation in acute kidney injury. Nephron ExpNephrol, 2008, v .109, n.4, p. 102-107.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

NADER, Fernanda Dias et al.. MODULAÇÃO DE RHO GTPASES POR ESFINGOSINA 1-FOSFATO COMO PROPOSTA TERAPÊUTICA CONTRA DOENÇAS RENAIS: UMA NOVA GERAÇÃO DE BIOFÁRMACOS?.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/316074-MODULACAO-DE-RHO-GTPASES-POR-ESFINGOSINA-1-FOSFATO-COMO-PROPOSTA-TERAPEUTICA-CONTRA-DOENCAS-RENAIS--UMA-NOVA-GERA. Acesso em: 04/08/2025