IDENTIFICAÇÃO DE NOVOS COMPOSTOS PEPTIDEOMIMÉTICOS COMO INIBIDORES DA ENZIMA O-GLCNAC TRANSFERASE (OGT)

Hilary Cesário Gonçalves; Patrícia de Carvalho Cruz; Pedro Henrique Rodrigues de Alencar Azevedo; Estela Muri; Wagner Barbosa Dias; Adriane Regina Todeschini

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Trabalho

Título do Trabalho

IDENTIFICAÇÃO DE NOVOS COMPOSTOS PEPTIDEOMIMÉTICOS COMO INIBIDORES DA ENZIMA O-GLCNAC TRANSFERASE (OGT)

Autores

Hilary Cesário Gonçalves
Patrícia de Carvalho Cruz
Pedro Henrique Rodrigues de Alencar Azevedo
Estela Muri
Wagner Barbosa Dias
Adriane Regina Todeschini

Modalidade

Resumo apresentação oral curta

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Biofísica

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/315676-identificacao-de-novos-compostos-peptideomimeticos-como-inibidores-da-enzima-o-glcnac-transferase-(ogt)

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

OGT, compostos peptideomiméticos, Inibidores, Câncer.

Resumo

A O-GlcNAcilação é uma modificação pós-tradução dinâmica e essencial para a vida, que liga o metabolismo à função celular (Hart, 2019). Trata-se de um açúcar, N-acetilglucosamina (GlcNAc) onipresente e único ligado a resíduos de serina ou treonina em proteínas intracelulares. O-GlcNAc é adicionado às proteínas por uma única enzima, a O-GlcNAc transferase (OGT), enquanto a enzima O-GlcNAcase (OGA) remove esta modificação. A síntese de UDP-GlcNAc, substrato da OGT envolve metabólitos de todas as quatro biomoléculas principais (carboidrato, aminoácido, ácido graxo e ácido nucleico), o que implica que O-GlcNAc atua como um sensor do estado metabólico de uma célula. Além disso, a atividade OGT é sensível a uma ampla gama de concentrações de UDP-GlcNAc (Kreppel and Hart, 1999). Consequentemente, conforme mais ou menos substrato se torna disponível, a célula pode usar variações em O-GlcNAc para controlar a expressão gênica para responder às flutuações de nutrientes ambientais. Evidências presentes na literatura sugerem que a O-GlcNAcilação desempenha um papel importante em eventos relacionados a tumorigênese como transição epitelia-mesenquimal, proliferação celular, e metástase, o que sugere que a OGT, possa ser um potencial alvo na tentativa de reduzir a progressão tumoral (Carvalho-Cruz et al., 2018). O objetivo principal deste trabalho é o estudo de compostos peptideomiméticos como inibidores competitivos de OGT. Para isso a OGT humana recombinante foi expressa em Escherichia coli e purificada por cromatografia de afinidade de níquel, e logo após, 49 compostos peptideomiméticos contendo um cerne estatina incorporando diferentes resíduos de aminoácidos foram sintetizados pelo Laboratório de Química Medicinal, da Universidade Federal Fluminense. Os 49 compostos (100 µM), foram testados em um volume de 25 µL contendo UDP-GlcNAc 100 µM, peptídeo CKII 100 µM (YPGGSTPVSSANMM) e OGT 0,15 µg em tampão Tris-HCl 50 mM, pH 7,5; DTT 1 mM; MgCl2 12,5 mM. A atividade OGT foi medida por bioluminescência usando o kit UDP-Glo (Promega) que detecta a quantidade de UDP livre formado. Este UDP é convertido em ATP que é usado na reação luciferase / luciferina e a luz gerada se correlaciona com a quantidade de UDP produzida pela glicosiltransferase. Dos 49 compostos testados, o LQMed 430 e 435 apresentaram 100% de inibição da atividade de OGT. Como perspectivas futuras, esperamos realizar IC50 destes compostos, testá-los em modelos in vivo e realizar estudos de modelagem molecular a fim de refinar a seleção desses protótipos a inibidores. Em conclusão, acreditamos que esses resultados representem uma importante etapa inicial para a identificação de novas estruturas que possam inibir de forma eficiente a OGT e, consequentemente, diminuir a progressão tumoral, trazendo a descoberta de novos fármacos que podem ser utilizados no tratamento de doenças como o câncer. Referências bibliográficas: Carvalho-Cruz P, Alisson-Silva F, Todeschini AR, Dias WB, 2018. Cellular glycosylation senses metabolic changes and modulates cell plasticity during epithelial to mesenchymal transition. Dev. Dyn. 247, 481-491. https://doi.org/10.1002/dvdy.24553. Hart GW, 2019. Nutrient regulation of signaling and transcription. J. Biol. Chem. 294, 2211–2231. https://doi.org/10.1074/jbc.AW119.003226 Kreppel LK, Hart GW, 1999. Regulation of a cytosolic and nuclear O-GlcNAc transferase. Role of the tetratricopeptide repeats. J. Biol. Chem. 274, 32015–32022. https://doi.org/10.1074/jbc.274.45.32015

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

GONÇALVES, Hilary Cesário et al.. IDENTIFICAÇÃO DE NOVOS COMPOSTOS PEPTIDEOMIMÉTICOS COMO INIBIDORES DA ENZIMA O-GLCNAC TRANSFERASE (OGT).. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/315676-IDENTIFICACAO-DE-NOVOS-COMPOSTOS-PEPTIDEOMIMETICOS-COMO-INIBIDORES-DA-ENZIMA-O-GLCNAC-TRANSFERASE-(OGT). Acesso em: 04/08/2025