ALTERAÇÕES NO PROCESSO DE MIOGÊNESE PELA REPLICAÇÃO DO VÍRUS ZIKA NO TECIDO MUSCULAR IN VITRO E EM MODELO MURINO DE TRANSMISSÃO MATERNO-FETAL

Laryssa Daniele Miranda Pinto; Daniel Gavino Leopoldino; Camila Menezes Figueiredo; Mariana Oliveira Lopes da Silva; Letícia Barcellos; Rômulo L. S. Neris; Iranaia Assunção Miranda

Título do Trabalho

Autores

Laryssa Daniele Miranda Pinto
Daniel Gavino Leopoldino
Camila Menezes Figueiredo
Mariana Oliveira Lopes da Silva
Letícia Barcellos
Rômulo L. S. Neris
Iranaia Assunção Miranda

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Virologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/315142-alteracoes-no-processo-de-miogenese-pela-replicacao-do-virus-zika-no-tecido-muscular-in-vitro-e-em-modelo-murino-

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

vírus zika, transmissão materno-fetal, dano muscular

Resumo

O aumento de casos de Síndrome de Guillain-Barré e de microcefalia após infecções pelo vírus zika (ZIKV) levou à percepção de que existe uma relação entre a infecção pelo ZIKV e a incidência de complicações neurológicas (Krauer et al., 2017). Contudo, diferentes aspectos da patogênese do ZIKV permanecem em aberto, principalmente sobre o impacto da infecção no desenvolvimento de outros tecidos não-neurais. Recentemente demonstramos que o ZIKV infecta e replica em mioblastos humanos, onde uma alta progênie viral infecciosa foi sustentada ao longo dos dias, sendo a forma indiferenciada mais suscetível à infecção e com maior perda de viabilidade (Gavino-Leopoldino et al.2019). Uma vez que precursores miogênicos são alvo da infecção, o músculo pode ter papel importante servindo como um sítio de replicação e amplificação da carga, persistência e disseminação viral para outros tecidos. Nossa hipótese é de que sendo as células precursoras musculares alvos da infecção pelo ZIKV na ocorrência de uma infecção intrauterina, o músculo seria um sítio de amplificação viral, lesão e inflamação, impactando no processo de desenvolvimento das fibras, gerando prejuízo de longo prazo na fisiologia tecidual. Nosso objetivo é estudar a replicação e os danos musculares in vitro e em modelo murino de transmissão materno-fetal do ZIKV, e as consequências de curto e longo prazo no processo de miogênese. Os experimentos deste trabalho foram aprovados pelo Comitê de Ética em experimentação Animal da UFRJ sob o protocolo n° 036/18. A linhagem de mioblastos murinos C2C12 foi infectada com ZIKV-BRPE (Ref.KX197192) com MOI 10 durante o processo de diferenciação. Após 5 dias as células foram fixadas com formaldeído 4% em PBS e as fibras foram marcadas com MF20 (anticorpo para cadeia pesada da miosina) e analisadas por microscopia de fluorescência. Análise quantitativa das fibras foi realizada com o software ImageJ, onde a quantidade de fibras foi normalizada pelo número de núcleos celulares marcados, demonstrando uma redução significativa do número e da área de fibras formadas quando infectadas pelo ZIKV em relação ao grupo controle. No modelo in vivo utilizamos camundongos fêmeas da linhagem SV/A129 com 12 dias de gestação infectadas com 10^5 pfu de ZIKV ou Mock. Após o nascimento, coletamos o músculo esquelético e o cérebro dos filhotes, assim como a placenta, útero e músculo da fêmea infectada para análise da carga viral por PCR em tempo real. O RNA do ZIKV foi detectado nos tecidos da prole, demonstrando a transmissão materno-fetal, e a infecção no 12ºdg resultou em uma ninhada menor em relação ao grupo Mock. Para as análises histopatológicas, a fêmea do grupo infectado e os filhotes de ambos os grupos foram eutanasiados no dia do nascimento dos filhotes e os tecidos das proles foram coletados e fixados em formaldeído 4% para posterior inclusão em parafina. As amostras foram seccionadas com aproximadamente 5µm e coradas com hematoxilina e eosina. Pela análise de H&E do músculo observamos sítios de lesão com intenso infiltrado celular e necrose. Além disso, foi possível detectar intermediários de replicação viral por IHC no tecido muscular utilizando o anticorpo J2. Nossos dados nos permitem concluir que a replicação do ZIKV pode afetar a formação de novas fibras in vitro e que o músculo é um sítio de lesão da infecção pelo ZIKV no modelo in vivo. GAVINO-LEOPOLDINO, D. et al. Estudo da replicação do vírus zika em células musculares e sua contribuição na patogênese. Orientador: Iranaia Assunção Miranda. 2019. 65 f. Dissertação (Mestrado em ciências: Microbiologia) - Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de janeiro, 2019. Krauer, Fabienne et al. “Zika Virus Infection as a Cause of Congenital Brain Abnormalities and Guillain-Barré Syndrome: Systematic Review” PLoS medicine vol. 14,1 e1002203. 3Jan. 2017, doi:10.1371/journal.pmed.1002203

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

PINTO, Laryssa Daniele Miranda et al.. ALTERAÇÕES NO PROCESSO DE MIOGÊNESE PELA REPLICAÇÃO DO VÍRUS ZIKA NO TECIDO MUSCULAR IN VITRO E EM MODELO MURINO DE TRANSMISSÃO MATERNO-FETAL.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/315142-ALTERACOES-NO-PROCESSO-DE-MIOGENESE-PELA-REPLICACAO-DO-VIRUS-ZIKA-NO-TECIDO-MUSCULAR-IN-VITRO-E-EM-MODELO-MURINO-. Acesso em: 23/06/2025