ADMINISTRAÇÃO INTRAPLEURAL DO COMPOSTO 48/80 COMO MODELO DE DEPLEÇÃO E REPOPULAÇÃO DE MASTÓCITOS EM CAMUNDONGOS BALB/C

Gabriel Max Silva Romeiro; Cássio Hernandes Gumes da Silva; Lucas Babo Ribeiro Da Silva; Natalia Recardo Amorim Tasmo; Bruno Diaz

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Trabalho

Título do Trabalho

ADMINISTRAÇÃO INTRAPLEURAL DO COMPOSTO 48/80 COMO MODELO DE DEPLEÇÃO E REPOPULAÇÃO DE MASTÓCITOS EM CAMUNDONGOS BALB/C

Autores

Gabriel Max Silva Romeiro
Cássio Hernandes Gumes da Silva
Lucas Babo Ribeiro Da Silva
Natalia Recardo Amorim Tasmo
Bruno Diaz

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Imunologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/314999-administracao-intrapleural-do-composto-4880-como-modelo-de-deplecao-e-repopulacao-de-mastocitos-em-camundongos-b

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Mastócito, Composto 48/80, Balb/c, Administração intrapleural

Resumo

Mastócitos são leucócitos que participam de reações alérgicas e que além de produzirem e secretarem mediadores químicos em uma resposta tardia são também capazes de exocitar seus grânulos citoplasmáticos liberando substâncias prontas em uma resposta inicial. Após maturação local em determinado tecido, podem ser classificados como mastócitos de mucosa (MMCs) ou de tecido conjuntivo (CTMCs), a depender do microambiente. O estudo do papel de mastócitos em diferentes condições fisiopatológicas é facilitado pelo uso do Composto 48/80 (C48/80), por sua indução da degranulação e desaparecimento destas células no tecido onde é administrado. Contudo, não é claro se este efeito limita-se à degranulação intensa e consequente impossibilidade de identificação histoquímica de mastócitos por coloração do conteúdo granular ou se ele implica na eliminação destas células no tecido com posterior repopulação. O objetivo do projeto é investigar o papel do C48/80 como ferramenta para estudo de diferentes populações de mastócitos e seus papéis na resposta imune. O impacto da administração de C48/80 será avaliado em termos tanto da degranulação quanto da eliminação dessas células do local onde residem. Para isso, camundongos Balb/c receberão injeção intrapleural de C48/80 e, diferentes dias após administração, serão eutanasiados para coleta do material intrapleural e peritoneal. Células da medula óssea desses animais serão coletadas e cultivadas sob suplementação com IL-3 para obtenção de mastócitos com fenótipo imaturo (BMMCs), pois também é de interesse do grupo produzir CTMCs a partir de co-cultura destes BMMCs com células de fibroblasto 3T3. A partir dos lavados coletados serão confeccionadas lâminas histológicas coradas com panótico rápido (para contagem diferencial de leucócitos) e azul de toluidina (para contagem diferencial de mastócitos), além de ser feita citometria de fluxo com marcação de anticorpos específicos para os receptores membranares de mastócito CD117 e FceRI (para verificar a presença de mastócitos) e para as subunidades a4 e ß7 da integrina membranar a4ß7 de progenitores de mastócitos (para avaliar o grau de maturação dos mastócitos). A diferenciação de mastócitos a partir de células da medula óssea em meio com IL-3 produziu após 4 semanas de cultura uma população com 100% de mastócitos, verificado tanto por histoquímica (presença de grânulos metacromáticos por coloração com azul de toluidina) quanto por citometria de fluxo positiva para CD117 e FceRI. Lâminas de lavado peritoneal confeccionadas com os dois tipos de marcação apresentaram porcentagem esperada de mastócitos peritoneais (CTMCs). Uma análise de citometria de fluxo desta mesma amostra com marcação com anticorpos para CD117 e FceRI indicou quantidade de mastócitos abaixo do esperado. Para otimizar a marcação vamos purificar a população de mastócitos peritoneais por gradiente de concentração em Percoll. Ao fim destes experimentos, esperamos melhor entender o mecanismo do C48/80 na fisiologia de mastócitos e contribuir para o entendimento geral do controle do número e diferenciação destas células nos tecidos. AMORIM, Natália RT et al. Leptin elicits in vivo eosinophil migration and activation: key role of mast cell-derived PGD2. Frontiers in Endocrinology, v. 11, 2020. LEVI-SCHAFFER, Francesca et al. Coculture of interleukin 3-dependent mouse mast cells with fibroblasts results in a phenotypic change of the mast cells. Proceedings of the National Academy of Sciences, v. 83, n. 17, p. 6485-6488, 1986. WASSERMAN, Stephen I. Mast cell biology. Journal of allergy and clinical immunology, v. 86, n. 4, p. 590-593, 1990.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

ROMEIRO, Gabriel Max Silva et al.. ADMINISTRAÇÃO INTRAPLEURAL DO COMPOSTO 48/80 COMO MODELO DE DEPLEÇÃO E REPOPULAÇÃO DE MASTÓCITOS EM CAMUNDONGOS BALB/C.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/314999-ADMINISTRACAO-INTRAPLEURAL-DO-COMPOSTO-4880-COMO-MODELO-DE-DEPLECAO-E-REPOPULACAO-DE-MASTOCITOS-EM-CAMUNDONGOS-B. Acesso em: 14/05/2025