REGULAÇÃO DA LIBERAÇÃO DE LIPOCALINA-2 DE CÉLULAS RENAIS DE LINHAGEM HK-2 POR FOXO3A: PAPEL DO ÍON COBRE

Dayanne Christine Sousa silva; Rafael Ramos Hospodar Felippe Valverde; MARCELO EINICKER LAMAS; Pedro Pompeu Fernandes da Costa

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Trabalho

Título do Trabalho

REGULAÇÃO DA LIBERAÇÃO DE LIPOCALINA-2 DE CÉLULAS RENAIS DE LINHAGEM HK-2 POR FOXO3A: PAPEL DO ÍON COBRE

Autores

Dayanne Christine Sousa silva
Rafael Ramos Hospodar Felippe Valverde
MARCELO EINICKER LAMAS
Pedro Pompeu Fernandes da Costa

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Biofísica

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/314397-regulacao-da-liberacao-de-lipocalina-2-de-celulas-renais-de-linhagem-hk-2-por-foxo3a--papel-do-ion-cobre

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

LCN-2, Rim, HK-2, Akt, FOXO3a

Resumo

Dayanne Christine; Pompeu F. da Costa, P; Thayana Roberta, Marcelo Einicker Lamas, Rafael H.F. Valverde Tema: O Rim possui notável importância na manutenção do equilíbrio eletrolítico e ácido-base dos fluidos corporais, sendo a unidade funcional deste órgão, o néfron. As nefropatias figuram dentre os principais desafios a saúde pública do país. A lipocalina-2 (LCN-2) é uma proteína secretada em situações de lesão, atualmente usada como marcadora de lesão renal aguda ou crônica. Essa molécula possui importantes funções já descritas, sendo um agente bacteriostático, quimiotrator de neutrófilos e antioxidante, além de se relacionar com vias de sobrevivência e proliferação celular. Trabalhos anteriores relacionaram a liberação de LCN-2 com o excesso de cobre em neurônios. O fator de transcrição FoxO3a modula o ciclo celular, a apoptose e a resposta ao estresse oxidativo tendo sido relacionado previamente com a expressão de LCN-2. FoxO3a é alvo de fosforilação das cinases Akt e Erk o que leva a exportação de FoxO3a do núcleo para o citoplasma, inibindo a transcrição de seus genes alvos incluindo o de LCN-2. A via de Erk foi recentemente demonstrada como ativada por cobre. Objetivo: Sabendo dos efeitos protetores contra o estresse oxidativo e na transição epitélio mesenquimal de células cancerígenas, este trabalho tem como objetivo avaliar a relação entre a os níveis de cobre e a expressão de LCN-2 em células renais humanas (HK-2). Buscamos elucidar os mecanismos envolvidos nesse processo, com foco na via das cinases Akt e Erk, e seu efeito no fator de transcrição FOXO3a. Metodologia: Células do túbulo proximal humano(HK-2) foram cultivadas em meio K-SFM suplementado com 2% de soro fetal bovino (SFB). As células foram suprimidas do SFB 15 horas antes dos experimentos e tratadas com diferentes concentrações de CuCl2 ou do quelante de cobre, BCS, por 24 horas. Para os ensaios de viabilidade, o método de fluorescência foi utilizado através do corante Presto Blue. As células foram lisadas e ressuspendidas em tampões específicos para a técnica de western blotting. Os meios condicionados foram coletados para a medição da secreção da LCN-2 utilizando um kit baseado em técnica de ELISA. Resultados: O tratamento com Cobre não afetou significativamente a viabilidade das células, tendo efeito tóxico apenas em concentrações acima de 50 µM, com taxa de morte superior a 50% (em 100 µM).O tratamento com cobre causou aumento na liberação de LCN-2 por HK-2. Ensaios de microscopia de fluorescência evidenciaram um aumento da localização de FoxO3a no núcleo de forma dose-dependente ao aumento das concentrações de cobre no meio. Uma diminuição na presença de Akt ativa, fosforilada, foi observada por western blot de forma inversamente proporcional a concentração de cobre. Os resultados indicam que o tratamento com Cobre poderia regular a via de Akt/FoxO3a, e com isso contribuir para a liberação de LCN-2 neste sistema.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

SILVA, Dayanne Christine Sousa et al.. REGULAÇÃO DA LIBERAÇÃO DE LIPOCALINA-2 DE CÉLULAS RENAIS DE LINHAGEM HK-2 POR FOXO3A: PAPEL DO ÍON COBRE.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/314397-REGULACAO-DA-LIBERACAO-DE-LIPOCALINA-2-DE-CELULAS-RENAIS-DE-LINHAGEM-HK-2-POR-FOXO3A--PAPEL-DO-ION-COBRE. Acesso em: 13/05/2025