ESTUDO DE INIBIDORES DE HISTONAS DEACETILASES NA REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO GÊNICA: RELEVÂNCIA PARA O CONTROLE DE INFECÇÕES POR VÍRUS

Caroline Carvalho; Teresa C. Calegari-Silva; Ulisses Gazos Lopes

Título do Trabalho

Autores

Caroline Carvalho
Teresa C. Calegari-Silva
Ulisses Gazos Lopes

Modalidade

Resumo apresentação oral curta

Área temática

Campus Duque de Caxias/Outros

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/314213-estudo-de-inibidores-de-histonas-deacetilases-na-regulacao-da-expressao-genica--relevancia-para-o-controle-de-inf

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

HDAC, vírus, HBMEC, macrófago

Resumo

O estudo de interações patógeno-hospedeiro do ponto de vista epigenético oferece uma oportunidade para explorar mecanismos moleculares relacionados à regulação da expressão gênica, fornecendo informações para identificar alvos moleculares para intervenção terapêutica. Modificações pós-traducionais de histonas, como a acetilação de histonas, desempenham um importante papel na regulação da estrutura da cromatina e expressão gênica e são mantidas pelo balanço das atividades de duas enzimas: histonas acetiltransferases (HATs) e histonas deacetilases (HDACs). As HDACs removem grupos acetil de resíduos de lisina em histonas e regulam a arquitetura da cromatina promovendo o silenciamento da expressão gênica (Arrowsmith HC. et al, 2010). Estudos anteriores do nosso grupo demonstraram que a HDAC1 é requerida para o sucesso da infecção por Leishmania amazonensis (Calegari-Silva TC. et al,2018). Resultados obtidos por RNAseq, que foram realizados em macrófagos THP1 silenciados para a expressão da HDAC1 demonstraram que o perfil de expressão gênica era reprogramado, apresentando um perfil de aumento da expressão de genes relacionados a resposta anti-viral. Baseado nestes resultados, o presente trabalho propõe testar a hipótese de que inibidores de histonas deacetilases (Tricostatina A- TSA – inibidor global da atividade das HDACs e MS-275- inibidor específico da atividade da HDAC1 e 3), amplamente utilizados em terapias anti-câncer, são capazes de reprogramar a expressão gênica pelo aumento da expressão de genes relacionados a mecanismos antivirais e dessa forma, auxiliando no controle de infecção por vírus. Nos estudos foram utilizados como modelo macrófagos THP1, e células do endotélio microvascular cerebral humano (HBMEC). Estas foram tratadas com diferentes concentrações de TSA (100 nM, 200 nM e 300 nM) e MS-275(100, 300 e 500nM) durante 24horas e após o tratamento foi realizado o teste de viabilidade celular pelo método de MTT. Os resultados obtidos mostraram que as concentrações testadas não comprometeram a viabilidade celular. Foi também avaliado a atividade dos inibidores. Para isso, ensaios de western blot, foram feitos para analisar o perfil dos níveis de acetilação da histona H3 nos resíduos de lisina 9/14 (H3K9/14Ac). Após o tratamento dos macrófagos com os inibidores, o extrato de histonas foi submetido ao western blot. Os resultados demonstraram que esses inibidores são efetivos na inibição da atividade da HDACs pois verificou-se um aumento da acetilação dos resíduos de lisina. Em seguida, nós realizamos a análise do perfil de expressão gênica dos genes (OAS1, GBP1, IRF6, IRF7) dos macrófagos THP-1 e células HBMEC tratados com os inibidores de HDAC, Tricostatina A e MS-275, por meio de qRT-PCR. Resultados preliminares demonstraram o aumento dos níveis de transcritos de OAS1 e IRF6 em HMBC tratadas com os inibidores de HDAC. Os experimentos serão repetidos e como perspectivas pretendemos avaliar a expressão de outros genes antivirais e avaliar o curso da infecção viral frente ao tratamento com os inibidores de HDAC. Referências Bibliográficas: -Arrowsmith CH, bountra C, Fish PV, Lee K, Schapira M. Epigenetic protein families: a new frontier for drug discovery. Nature reviews. 11: 384-400(2012) - Calegari-Silva TC, Vivarini ÁC, Pereira RMS, Dias-Teixeira KL, Rath CT, Pacheco ASS, Silva GBL, Pinto CAS, Dos Santos JV, Saliba AM, Corbett CEP, de Castro Gomes CM, Fasel N, Lopes UG. 2018. Leishmania amazonensis downregulates macrophage iNOS expression via Histone Deacetylase 1 (HDAC1): a novel parasite evasion mechanism. Eur J Immunol., 48(7):1188-1198.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

CARVALHO, Caroline; CALEGARI-SILVA, Teresa C.; LOPES, Ulisses Gazos. ESTUDO DE INIBIDORES DE HISTONAS DEACETILASES NA REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO GÊNICA: RELEVÂNCIA PARA O CONTROLE DE INFECÇÕES POR VÍRUS.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/314213-ESTUDO-DE-INIBIDORES-DE-HISTONAS-DEACETILASES-NA-REGULACAO-DA-EXPRESSAO-GENICA--RELEVANCIA-PARA-O-CONTROLE-DE-INF. Acesso em: 16/05/2025