O RECEPTOR P2Y2 ENDOTELIAL FAVORECE A ADESÃO DE CÉLULAS DE CÂNCER DE PRÓSTATA ÀS CÉLULAS ENDOTELIAIS HUMANAS

Marianna Araujo Rocha; TASSYA CATALDI CARDOSO; Claudia Lucia Martins da Silva

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Trabalho

Título do Trabalho

O RECEPTOR P2Y2 ENDOTELIAL FAVORECE A ADESÃO DE CÉLULAS DE CÂNCER DE PRÓSTATA ÀS CÉLULAS ENDOTELIAIS HUMANAS

Autores

Marianna Araujo Rocha
TASSYA CATALDI CARDOSO
Claudia Lucia Martins da Silva

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Farmacologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/314206-o-receptor-p2y2-endotelial-favorece-a-adesao-de-celulas-de-cancer-de-prostata-as-celulas-endoteliais-humanas

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

sinalização purinérgica, endotélio, câncer, diapedese

Resumo

INTRODUÇÃO O câncer (CA) de próstata é um tipo de tumor maligno com cerca de 1,28 milhão de casos no mundo, podendo ser localizado ou metastático. As células endoteliais revestem a luz vascular e regulam a . adesão e transmigração celulares. Na disfunção endotelial sofrem mudança para fenótipo ativado que favorece adesão celular (Strassheim et al., 2020). O microambiente tumoral tem alta concentração de nucleotídeos extracelulares secundário à morte celular, desencadeando a sinalização purinérgica parácrina. ATP e UTP são agonistas endógenos de receptores purinérgicos P2Y2. Os P2Y2R endoteliais aumentam a expressão de moléculas de adesão favorecendo a interação endotélio-tumor. Nossa hipótese é que P2Y2R contribuem para a adesão da célula tumoral DU-145 e formação do nicho metastático, e que a inibição desta etapa pode reduzir o processo metastático. Os objetivos do estudo foram caracterizar o efeito do P2Y2R na adesão de células de CA de próstata à monocamada endotelial, e investigar o efeito da atorvastatina sobre a sinalização purinérgica neste modelo. METODOLOGIA Células endoteliais humanas (CEH) EA.hy926 e as células de CA de próstata humana DU-145 foram cultivadas em meios DMEM e RPMI enriquecidos com soro fetal bovino 10% e antibióticos (37oC, 5% CO2). As CEH (96 poços) foram pré-tratadas com agonistas purinérgicos (UTP 100 µM, 2thioUTP 100 nM, 4h) ou veículo (basal), na ausência e presença do antagonista suramina ou inibidores enzimáticos (U73122, ARL 67156; adicionados 30 min antes), ou atorvastatina (adicionada 24h antes). Em seguida as células DU-145 marcadas com calceína foram adicionadas e co-incubadas (30 min). Os poços foram lavados e fotografados para contagem de células ao microscópio (200X). Os experimentos foram realizados em triplicata com pelo menos três experimentos para cada condição. Dados expressos como média e EPM. RESULTADOS O tratamento das CEH com UTP e 2thioUTP (agonista seletivo P2Y2R) induziu a adesão de células DU-145 às CEH (29,3 +/- 2,3 e 32,95 +/- 2,7 céls/poço, respectivamente, vs basal 15 +/- 0,9, P < 0,05 ANOVA, Newman-Keuls teste). Este efeito foi bloqueado pelo pré-tratamento com suramina 100 µM. ATP e UTP tem a mesma afinidade e eficácia para P2Y2R (Öhman et al., 2012) e ambos estimularam de forma semelhante a adesão tumoral. O quelante intracelular de Ca2+ BAPTA-AM (3 µM) inibiu o efeito pró-adesivo do UTP, o que é compatível com a sinalização do P2Y2R via Gq. Por serem receptores metabotrópicos (Gq), avaliou-se o efeito do inibidor de PLC (U-73122 1 µM), cujo tratamento prévio evitou a adesão mantendo valores igual ao basal. E a inibição da NTPDase (CD39) com ARL 67156 100 µM não afetou efeito o do UTP, sugerindo que ele não é degradado no tempo do experimento. Em conjunto os dados sugerem que UTP favorece adesão de células tumorais via P2Y2R endoteliais. As estatinas exercem efeitos sobre o endotélio desfavorecendo o fenótipo ativado. No nosso modelo, o pré-tratamento das CE com atorvastatina (1 µM, 24h) inibiu a adesão induzida por UTP (10,9 +/- 0,8, P < 0,05). CONCLUSÃO A ativação do P2Y2R estimula a adesão de células DU-145 às CEH sugerindo a contribuição desta via para o processo metastático no CA de próstata. Este efeito é inibido pela atorvastatina. Apoio: CNPq BIBLIOGRAFIA ÖHMAN, Jenny; ERLINGE, David. The touching story of purinergic signaling in epithelial and endothelial cells. Purinergic Signal., 2012, 8:3, 599. STRASSHEIM, Derek et al. P2Y Purinergic Receptors, Endothelial Dysfunction, and Cardiovascular Diseases. Int. J. Mol. Sci., 2020, 21:18, 6855.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

ROCHA, Marianna Araujo; CARDOSO, TASSYA CATALDI; SILVA, Claudia Lucia Martins da. O RECEPTOR P2Y2 ENDOTELIAL FAVORECE A ADESÃO DE CÉLULAS DE CÂNCER DE PRÓSTATA ÀS CÉLULAS ENDOTELIAIS HUMANAS.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/314206-O-RECEPTOR-P2Y2-ENDOTELIAL-FAVORECE-A-ADESAO-DE-CELULAS-DE-CANCER-DE-PROSTATA-AS-CELULAS-ENDOTELIAIS-HUMANAS. Acesso em: 24/06/2025