AVALIAÇÃO DO EFEITO DA PIRFENIDONA SOBRE A FIBROSE CARDÍACA NO MODELO TRIDIMENSIONAL DE CULTURA DE CÉLULAS DURANTE A INFECÇÃO PELO TRYPANOSOMA CRUZI

Clara Monteiro Seydel; Laura Lacerda Coelho; Beatriz Matheus de Souza Gonzaga; Luciana R. Garzoni

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Trabalho

DOI

10.29327/fisiopat2023.657403

Título do Trabalho

AVALIAÇÃO DO EFEITO DA PIRFENIDONA SOBRE A FIBROSE CARDÍACA NO MODELO TRIDIMENSIONAL DE CULTURA DE CÉLULAS DURANTE A INFECÇÃO PELO TRYPANOSOMA CRUZI

Autores

Clara Monteiro Seydel
Laura Lacerda Coelho
Beatriz Matheus de Souza Gonzaga
Luciana R. Garzoni

Modalidade

Resumo

Área temática

Doenças Infecciosas

Data de Publicação

10/02/2025

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/fisiopat2023/657403-avaliacao-do-efeito-da-pirfenidona-sobre-a-fibrose-cardiaca-no-modelo-tridimensional-de-cultura-de-celulas-durant

ISBN

978-65-272-1162-4

Palavras-Chave

doença de Chagas, fibrose cardíaca, esferoides

Resumo

Introdução: A doença de Chagas (DC) é uma doença parasitária sistêmica que causa significativa morbimortalidade, se dividindo em fase aguda e crônica. Na fase crônica, as manifestações cardíacas são o aspecto mais importante da DC, devido à sua frequência e gravidade. Aproximadamente 30% dos indivíduos desenvolvem alterações cardíacas, sendo a miocardite chagásica a principal delas. Sua evolução leva ao desenvolvimento de fibrose e hipertrofia do tecido cardíaco, contribuindo para anormalidades funcionais e insuficiência cardíaca. Os principais mecanismos associados à miocardite parecem envolver a persistência do parasito no tecido e lesões inflamatórias crônicas imunomediadas que ocorrem desde a fase aguda. Apesar do alto grau de acometimento mundial da DC e da gravidade da cardiomiopatia, há uma limitação das estratégias terapêuticas, não havendo tratamento satisfatório, principalmente para a fase crônica e complicações, como a fibrose. Dessa forma, há a necessidade de terapias mais efetivas que revertam tal quadro clínico cardíaco. Nos estudos pré-clínicos, duas estratégias têm sido amplamente empregadas: o reposicionamento e a combinação de compostos conhecidos. Como vantagens, há o conhecimento dos perfis de farmacocinética para uso humano, a redução nas doses e tempo de tratamento, a redução dos efeitos colaterais e, por fim, a redução dos custos e do tempo de avaliação do fármaco. Entre os fármacos com propriedades anti-fibróticas estudados como possíveis candidatos à utilização na DC, está a Pirfenidona, usada no tratamento de fibrose pulmonar idiopática. Tal fármaco vem sendo reportado de forma promissora na literatura no contexto de doenças cardíacas, tendo como alvos vias envolvidas na gênese da fibrose no coração. Sistemas de cultura 3D mimetizam de forma mais fiel a arquitetura e funcionalidade dos tecidos. Previamente, nosso grupo estabeleceu um modelo 3D de células cardíacas que reproduz a fibrose e hipertrofia após a infecção com o T.cruzi, contribuindo para o entendimento da patogenia da DC. Objetivo: Avaliar o efeito anti-fibrótico do fármaco pirfenidona no modelo 3D de fibrose cardíaca induzida pelo T.cruzi. Métodos: Foi realizada a cultura primária de células cardíacas, obtidas à partir do coração de fetos de camundongos Swiss Webster com 18-21 dias de gestação. Para a produção dos esferoides cardíacos, as células foram adicionadas em placas de 96 poços contendo agarose a 1% e mantidas em DMEM suplementado com 8% de SFB, 2% de extrato embrionário, 2% de L-glutamina a 2,93%, 8% de CaCl2 e 1% de antibiótico a 37ºC, em atmosfera de 5% de CO2. Após uma semana, com os esferoides formados, foi feita a infecção destes utilizando MOI de 20 com as formas tripomastigotas da cepas Y do T.cruzi obtidas a partir de culturas em monocamada de células Vero. Com 144 horas de infecção, período no qual a fibrose já se estabeleceu, foi iniciado o tratamento com a pirfenidona (0,1; 1,0 e 2,0 mM) por 24h a 72 horas. Resultados: Até o momento, foram produzidos os esferoides e estabelecida a infecção. Esferoides apresentaram contração espontânea e a infecção aumentou seu tamanho. Verificamos aumento na expressão de fibronectina. Realizamos o ensaio de viabilidade celular e estabelecemos a concentração de 1 mM e o tempo de 72h para o tratamento. O próximo passo será avaliar o efeito do tratamento sobre a infecção pelo parasito e sobre as proteínas envolvidas na fibrose cardíaca (fibronectina, laminina, colágeno). Conclusão: Esperamos que o estudo contribua com a elucidação de novas estratégias terapêuticas contra a fibrose cardíaca na DC.

Título do Evento: II Congresso de Fisiologia e Patologia
Cidade do Evento: Rio de Janeiro
Título dos Anais do Evento: Anais do Congresso de Fisiologia e Patologia
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital
DOI

Como citar

SEYDEL, Clara Monteiro et al.. AVALIAÇÃO DO EFEITO DA PIRFENIDONA SOBRE A FIBROSE CARDÍACA NO MODELO TRIDIMENSIONAL DE CULTURA DE CÉLULAS DURANTE A INFECÇÃO PELO TRYPANOSOMA CRUZI.. In: Anais do Congresso de Fisiologia e Patologia. Anais...Rio de Janeiro(RJ) Fiocruz, 2023. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/fisiopat2023/657403-AVALIACAO-DO-EFEITO-DA-PIRFENIDONA-SOBRE-A-FIBROSE-CARDIACA-NO-MODELO-TRIDIMENSIONAL-DE-CULTURA-DE-CELULAS-DURANT. Acesso em: 09/05/2025