PADRONIZAÇÃO DE TÉCNICAS DE CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR PARA ESPÉCIES DE SPOROTHRIX SPP EM ISOLADOS CLÍNICOS DA CIDADE DE JOÃO PESSOA, PB

ALAN FRAZAO DA SILVA; LARISSA ALVES DA SILVA; Ana Maria Da Silva Freitas; Natalia Diniz Nunes Pazos; Francisco Bernardino  da Silva Neto; Lucio Roberto Cançado Castellano; Felipe Queiroga Sarmento Guerra; Ana Carolina Bernardes Dulgheroff

Título do Trabalho

Autores

ALAN FRAZAO DA SILVA
LARISSA ALVES DA SILVA
Ana Maria Da Silva Freitas
Natalia Diniz Nunes Pazos
Francisco Bernardino da Silva Neto
Lucio Roberto Cançado Castellano
Felipe Queiroga Sarmento Guerra
Ana Carolina Bernardes Dulgheroff

Modalidade

Resumo

Área temática

Genética / Biologia Molecular / Biotecnologia

Data de Publicação

07/02/2020

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/cvgufg3/237946-padronizacao-de-tecnicas-de-caracterizacao-molecular-para-especies-de-sporothrix-spp-em-isolados-clinicos-da-cida

ISBN

978-85-5722-421-6

Palavras-Chave

Esporotricose, Sporothrix, Identificação Molecular.

Resumo

A esporotricose é uma micose subcutânea que acomete humanos e animais e tem como agente etiológico, os fungos do gênero Sporothrix. Dentre as espécies pertencentes ao gênero Sporothrix, as de maior importância clínica são Sporothrix schenkii, Sporothrix brasiliensis e Sporothrix globosa, sendo a S. brasiliensis, o agente etiológico de maior destaque em surtos de esporotricose na américa do sul, com maior prevalência em regiões de clima tropical úmido e temperado, como o Brasil. Para combate do surto, o diagnóstico da esporotricose na rotina laboratorial se faz indispensável e é feito, geralmente, pelo semeio do exsudato das lesões em meios de cultura, para posterior avaliação das características morfológicas e fenotípicas de Sporothrix spp, sendo este, o método “padrão ouro” no diagnóstico. As espécies de Sporothrix spp são morfologicamente e fisiologicamente muito semelhantes, o que prejudica a diferenciação fenotípica das espécies, gerando um déficit epidemiológico da doença. Além disso, a identificação de cada espécie também é essencial, por estas apresentarem diferentes fatores de virulência, fontes de infecção e transmissão, distribuição geográfica e resistência a terapia antifúngica. Assim, outros métodos diagnósticos têm sido introduzidos na rotina, como a técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), a qual, de forma precisa, identifica cada uma das espécies de Sporothrix spp. Apesar da especificidade da PCR, é necessária a padronização desta técnica antes que passe a substituir ou seja usada em equivalência a técnica padrão ouro, evitando que possíveis erros no método não prejudiquem o resultado nem desfecho clínico dos pacientes. Tendo em vista a necessidade citada, este estudo tem como objetivo realizar a padronização das técnicas de caracterização molecular para espécies do gênero Sporothrix, mais observadas na clínica. Neste trabalho, foram utilizadas amostras clínicas (n=18), obtidas de pacientes atendidos em um hospital da cidade de João Pessoa, PB, além de amostras sequenciadas de S. brasiliensis e S. schenkii, como controle (n=2). A extração do DNA dessas amostras foi realizada por 2 diferentes métodos, o primeiro, um choque térmico em nitrogênio líquido com algumas adaptações e o segundo, a extração através de kit de coluna de sílica. Após a extração, as amostras seguiram para a etapa de PCR, na qual, foram utilizados primers espécie-específicos. Em seguida, os amplicons foram submetidos a eletroforese em gel de agarose, no qual, permitiu a visualização do padrão de bandas referente a cada uma das espécies. Apesar de executado para detectar S. brasiliensis e S. schenkii, o protocolo só foi eficaz na detecção da espécie S. brasiliensis, demonstrando ineficácia na detecção de S. schenkii, mesmo sendo aplicados os mesmos processos para todas as amostras. Assim, pode-se concluir que o protocolo ainda necessita de algumas adaptações para que possa ser utilizado na identificação molecular das espécies de Sporothrix spp.

Título do Evento: III Curso de Verão em Genética
Cidade do Evento: Goiânia
Título dos Anais do Evento: Anais III Curso de Verão em Genética da Universidade Federal de Goiás
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

SILVA, ALAN FRAZAO DA et al.. PADRONIZAÇÃO DE TÉCNICAS DE CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR PARA ESPÉCIES DE SPOROTHRIX SPP EM ISOLADOS CLÍNICOS DA CIDADE DE JOÃO PESSOA, PB.. In: Anais III Curso de Verão em Genética da Universidade Federal de Goiás. Anais...Goiânia(GO) Universidade Federal de Goiás, 2020. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/cvgufg3/237946-PADRONIZACAO-DE-TECNICAS-DE-CARACTERIZACAO-MOLECULAR-PARA-ESPECIES-DE-SPOROTHRIX-SPP-EM-ISOLADOS-CLINICOS-DA-CIDA. Acesso em: 04/10/2025