AVALIAÇÃO DA EXTRAÇÃO DE DIFERENTES TIPOS DE AMOSTRA DE CÃES COM LINFOMA PARA A PCR-PARR

Vinicio Cascardo; CARLA BEATRIZ VENTURA LEITE; Matheus de Souza Santana; Marcos Roberto Barros Freitas; FAB™OLA APARECIDA DE OLIVEIRA NOGUEIRA; Huarrisson Azevedo Santos; Thiago Souza Costa; ANDRESA GUIMAR€ES

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Trabalho

Título do Trabalho

AVALIAÇÃO DA EXTRAÇÃO DE DIFERENTES TIPOS DE AMOSTRA DE CÃES COM LINFOMA PARA A PCR-PARR

Autores

Vinicio Cascardo
CARLA BEATRIZ VENTURA LEITE
Matheus de Souza Santana
Marcos Roberto Barros Freitas
FAB™OLA APARECIDA DE OLIVEIRA NOGUEIRA
Huarrisson Azevedo Santos
Thiago Souza Costa
ANDRESA GUIMAR€ES

Modalidade

Resumo

Área temática

Ciências Agrárias - Medicina Veterinária

Data de Publicação

27/03/2026

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

pt-BR

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/xii-reuniao-anual-iniciacao-cientifica-da-ufrrj-raic/1323284-avaliacao-da-extracao-de-diferentes-tipos-de-amostra-de-caes-com-linfoma-para-a-pcr-parr

ISBN

978-65-272-2302-3

Palavras-Chave

PARR, Linfoma de células B, Linfoma de células T, Neoplasias

Resumo

O linfoma é a neoplasia hematopoiética mais prevalente em cães, cujo diagnóstico definitivo requer, além da citologia e da histopatologia, métodos complementares, como imunofenotipagem e análises moleculares. Entre estes, a técnica de PCR para detecção de Rearranjo de Receptor de Antígeno (PCR-PARR) tem se destacado por permitir identificar a clonalidade das células, diferenciando com maior precisão proliferações linfoides reativas de neoplásicas, além de determinar o fenótipo tumoral. O diagnóstico preciso é fundamental para o estadiamento, escolha terapêutica e prognóstico, visto que essa neoplasia apresenta comportamento clínico heterogêneo em cães. Este estudo teve como objetivo comparar a viabilidade de diferentes tipos de amostras: aspirados de linfonodo, lâminas citológicas e blocos parafinados, em cães com linfoma, bem como realizar a reação de PCR convencional para o controle endógeno das amostras que serão submetidas ao PARR. O presente projeto foi aprovado na CEUA (protocolo número: 2060160424), foram analisadas 46 amostras, incluindo aspirados de linfonodo (n=18), lâminas citológicas (n=17) e blocos parafinados (n=11). O DNA foi extraído pelo método fenol-clorofórmio, quantificado por espectrofotometria utilizando o equipamento Nanodrop 2000 e submetido à PCR convencional para o controle endógeno, utilizando o primers descritos na literatura (1) e protocolo adaptado (2). As concentrações foram padronizadas a 100 ng/µL sempre que possível, e amostras com menor rendimento foram utilizadas conforme disponíveis. Para testar as diferenças quantitativas das concentrações de DNA extraído entre os grupos de amostras em bloco, aspirado e lâminas foi utilizado o programa estatístico BioEstat 5.0. Inicialmente foi realizada a estatística descritiva dos dados (média aritmética, desvio padrão, erro padrão, valor mínimo e valor máximo), em seguida, para cada uma das 3 variáveis, foi testado a normalidade da distribuição dos dados através do teste de Lilliefors, porém os dados apresentaram distribuição não-paramétrica, por isso, foi utilizado teste de Mann-Whitney, à 5% de significância. A extração por fenol-clorofórmio demonstrou eficácia semelhante para blocos parafinados, lâminas citológicas e aspirados de linfonodo. Todas as amostras apresentaram amplificação positiva no controle endógeno, confirmando a integridade do DNA e sua adequação ao PARR. Embora tenham ocorrido variações nas concentrações entre os grupos, não houve diferenças estatisticamente significativas (p>0,05). Amostras com concentrações inferiores a 100 ng/µL também apresentaram desempenho satisfatório (Exemplo: Valor mínimo aspirado: 7,10 ng/µL, bloco: 11,70 ng/µL, lâmina: 7,60 ng/µL), em contraste com estudos anteriores que sugerem a necessidade de maiores quantidades de DNA (3). Além disso, blocos parafinados e lâminas citológicas, frequentemente descritos como limitantes devido à degradação ou baixo rendimento (2), mostraram desempenho equivalente aos aspirados, reforçando sua aplicabilidade como fontes confiáveis para o ensaio PARR. Esses resultados demonstram que a metodologia pode ser empregada com sucesso em diferentes tipos de amostras, ampliando as possibilidades de diagnóstico molecular em casos de linfoma canino. 1. BURNETT, R. C.; VERNAU, W.; MODIANO, J. F.; OLVER, C. S.; MOORE, P. F.; AVERY, A. C. Diagnosis of canine lymphoid neoplasia using clonal rearrangements of antigen receptor genes. Veterinary Pathology, v. 40, n. 1, p. 32-41, 2003. 2. NOWOSH, V.; MACIEIRA, D. B.; ALENCAR, N. X. Applicability of PCR-based clonality assay in dogs with multicentric lymphoma. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, v. 69, p. 761-765, 2017. 3. LANGNER, K. F. A.; JOETZKE, A. E.; NERSCHBACH, V.; EBERLE, N.; SCHUBERTH, H. J.; KOY, M.; NOLTE, I.; BETZ, D. Detection of clonal antigen receptor gene rearrangement in dogs with lymphoma by real-time polymerase chain reaction and melting curve analysis. BMC Veterinary Research, v. 10, n. 1, p. 1-5, 2014.

Título do Evento: XII Reunião Anual de Iniciação Científica da UFRRJ (RAIC 2025) & VI Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação (RAIDTec 2025)
Cidade do Evento: Seropédica
Título dos Anais do Evento: Anais da Reunião Anual de Iniciação Científica e Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação da UFRRJ - Justiça climática: por um mundo mais sustentável, justo e igualitário
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

CASCARDO, Vinicio et al.. AVALIAÇÃO DA EXTRAÇÃO DE DIFERENTES TIPOS DE AMOSTRA DE CÃES COM LINFOMA PARA A PCR-PARR.. In: Anais da Reunião Anual de Iniciação Científica e Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação da UFRRJ - Justiça climática: por um mundo mais sustentável, justo e igualitário. Anais...Seropédica(RJ) UFRRJ, 2025. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/xii-reuniao-anual-iniciacao-cientifica-da-ufrrj-raic/1323284-AVALIACAO-DA-EXTRACAO-DE-DIFERENTES-TIPOS-DE-AMOSTRA-DE-CAES-COM-LINFOMA-PARA-A-PCR-PARR. Acesso em: 29/05/2026