AVALIAÇÃO DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE COLORAÇÃO EM HEMÓCITOS DE RHIPICEPHALUS MICROPLUS DESAFIADOS COM FUNGO ENTOMOPATOGÊNICO

Liris Raphaella Turin de Morais Maki; Thaís Almeida Corrêa; Victória Silvestre Bório; Emily Mesquita da Silva; Vinícius Teixeira de Souza; Joana da Rocha Matos; Adriani da Silva Carneiro; Isabelle da Costa Angelo; Vânia Rita Elias Pinheiro Bittencourt; Patrícia Silva Gôlo

Título do Trabalho

Autores

Liris Raphaella Turin de Morais Maki
Thaís Almeida Corrêa
Victória Silvestre Bório
Emily Mesquita da Silva
Vinícius Teixeira de Souza
Joana da Rocha Matos
Adriani da Silva Carneiro
Isabelle da Costa Angelo
Vânia Rita Elias Pinheiro Bittencourt
Patrícia Silva Gôlo

Modalidade

Resumo

Área temática

Ciências Agrárias - Medicina Veterinária

Data de Publicação

27/03/2026

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

pt-BR

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/xii-reuniao-anual-iniciacao-cientifica-da-ufrrj-raic/1318401-avaliacao-de-diferentes-protocolos-de-coloracao-em-hemocitos-de-rhipicephalus-microplus-desafiados-com-fungo-ent

ISBN

978-65-272-2302-3

Palavras-Chave

carrapato-de-boi, sistema imune, Beauveria bassiana

Resumo

O carrapato Rhipicephalus microplus é um artrópode hematófago que tem como principal hospedeiro os bovinos, causando grandes prejuízos para a pecuária. Usualmente, o controle desses ectoparasitos é feito com acaricidas químicos que geram resíduos no ambiente. Estudos realizados evidenciam populações resistentes à diferentes classes de acaricidas, como piretróides, lactonas macrocíclicas e fenilpirazóis. Esse cenário reforça a necessidade métodos alternativos de controle e, entre as alternativas mais promissoras, destacam-se os fungos entomopatogênicos, agentes já utilizados com sucesso no manejo integrado de pragas agrícolas e com bons resultados também para o controle de carrapatos. O mecanismo de ação desses fungos baseia-se na adesão de seus conídios à superfície do artrópode. Após a fixação, ocorre a germinação e a penetração pela cutícula, possibilitando que o fungo entre em contato com a hemolinfa e os hemócitos, células centrais da resposta imune celular em artrópodes. Considerando esse processo, o presente estudo teve como objetivo caracterizar a morfologia dos hemócitos de R. microplus expostos a conídios de Beauveria bassiana LCM S20, bem como avaliar o processo de fagocitose desses propágulos. Para a condução dos ensaios, a hemolinfa foi coletada de fêmeas de R. microplus (CEUA n° 6274250624) com o auxílio de agulhas de insulina e capilares em meio L-15 suplementado com soro fetal bovino. As células foram quantificadas em câmara de Neubauer através microscopia óptica e um total de 2 x 10⁴ células foram alocadas em lamínulas circulares nas placas de cultura de 24 poços. As placas foram incubadas a 32 °C por 10 minutos para favorecer a formação de uma monocamada celular. Em seguida, adicionaram-se 20 µL da suspensão de conídios de B. bassiana LCM S20 e de Zymosan (Saccharomyces cerevisiae) na concentração de 1 x 106 conídios/ml e a placa foi incubada em estufa a 32 °C por duas horas, para o processo de fagocitose. Após o tempo de incubação, os hemócitos foram submetidos a três protocolos distintos de fixação em metanol e coloração com Giemsa, visando identificar aquele que proporcionasse melhores condições de visualização das células. O protocolo 1 consistiu na fixação das células em metanol por cinco minutos seguida da aplicação do corante Giemsa por dois minutos. Esse método resultou em lâminas com fundo limpo, embora apresentando baixa intensidade de coloração de núcleo, citoplasma e definição das bordas celulares. No protocolo 2, as células foram submetidas à fixação em metanol por 30 segundos seguida de 20 segundos de pré-coloração com May-Grünwald e 20 segundos em Giemsa. Os resultados mostraram coloração satisfatória de núcleo, citoplasma e borda, mas com fundo menos limpo e presença de debris celulares, o que dificultou parcialmente a análise. Já o protocolo 3, que incluiu fixação em metanol por três minutos e coloração com Giemsa por 30 minutos, demonstrou desempenho superior aos outros protocolos, proporcionando fundo mais limpo, maior intensidade de coloração do núcleo e citoplasma e definição mais nítida das bordas celulares. Essas características facilitaram a identificação de conídios fagocitados e possibilitaram melhor avaliação morfológica. Assim, os resultados apontam o protocolo 3 como a metodologia mais adequada para estudos de fagocitose de hemócitos de R. microplus desafiados por B. bassiana.

Título do Evento: XII Reunião Anual de Iniciação Científica da UFRRJ (RAIC 2025) & VI Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação (RAIDTec 2025)
Cidade do Evento: Seropédica
Título dos Anais do Evento: Anais da Reunião Anual de Iniciação Científica e Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação da UFRRJ - Justiça climática: por um mundo mais sustentável, justo e igualitário
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

MAKI, Liris Raphaella Turin de Morais et al.. AVALIAÇÃO DE DIFERENTES PROTOCOLOS DE COLORAÇÃO EM HEMÓCITOS DE RHIPICEPHALUS MICROPLUS DESAFIADOS COM FUNGO ENTOMOPATOGÊNICO.. In: Anais da Reunião Anual de Iniciação Científica e Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação da UFRRJ - Justiça climática: por um mundo mais sustentável, justo e igualitário. Anais...Seropédica(RJ) UFRRJ, 2025. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/xii-reuniao-anual-iniciacao-cientifica-da-ufrrj-raic/1318401-AVALIACAO-DE-DIFERENTES-PROTOCOLOS-DE-COLORACAO-EM-HEMOCITOS-DE-RHIPICEPHALUS-MICROPLUS-DESAFIADOS-COM-FUNGO-ENT. Acesso em: 29/05/2026