OBTENÇÃO DE CONSTRUÇÃO GENÉTICA PARA LOCALIZAÇÃO DAS REGIÕES DE EXPRESSÃO DO GENE OSDREB1C EM PLANTAS DE ARROZ (ORYZA SATIVA L.)

Dandara Verissimo Soprani; Maria Eduarda Pimentel de Melo; Erinaldo Gomes Pereira; Leandro Azevedo Santos

Título do Trabalho

Autores

Dandara Verissimo Soprani
Maria Eduarda Pimentel de Melo
Erinaldo Gomes Pereira
Leandro Azevedo Santos

Modalidade

Resumo

Área temática

Ciências Agrárias - Agronomia

Data de Publicação

22/04/2025

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/xi-raic-e-v-raidtec-ufrrj/931395-obtencao-de-construcao-genetica-para-localizacao-das-regioes-de-expressao-do-gene-osdreb1c-em-plantas-de-arroz-(o

ISBN

978-65-272-1295-9

Palavras-Chave

biologia molecular, estresse hídrico, genética.

Resumo

O arroz (Oryza sativa L.) é um cereal da família Poaceae cultivado e consumido globalmente, com potencial para reduzir o quadro de insegurança alimentar devido ao seu alto valor nutricional, sendo um dos principais produtos agrícolas no Brasil. A produção dessa cultura pode ser realizada em diferentes tipos de sistema, sendo o cultivo em sequeiro importante num cenário de escassez de recursos hídricos. No entanto, com o aumento da intensidade das mudanças climáticas, mesmo a produção em sequeiro tem apresentado problemas com a produtividade, gerando riscos para a segurança alimentar em todo o mundo. A seleção de genótipos tolerantes à seca e o uso de ferramentas da biologia molecular, que busca identificar e caracterizar genes potencialmente envolvidos com o aumento dessa tolerância, são estratégias importantes para enfrentar esses desafios. Dessa forma, o trabalho teve por objetivo desenvolver uma construção genética, usando a tecnologia Gateway (Invitrogen™), para identificar em arroz, os locais de expressão do gene OsDREB1C, por meio da fusão de sua região promotora a proteínas repórteres GFP e GUS. A ferramenta Gateway se dá como um método de recombinação que transfere fragmentos de DNA entre vetores de clonagem, preservando a sequência de leitura e sem gerar alterações nos nucleotídeos. Para tanto, primeiro foi feita, através de duas rodadas subsequentes de PCR, a amplificação de um segmento de 1.738bp da região promotora do gene upstream ao códon de início da tradução, contendo sítios de recombinação attB1 e attB2. O fragmento resultante foi purificado e clonado no vetor de entrada pDONR221, por meio da reação de recomendação BP. Após multiplicação em E. coli o plasmídeo resultante pENTR-POsDEB1C foi extraído e purificado. Em seguida, foi realizada uma reação de recombinação LR, agora entre o plasmídeo pENTR-POsDEB1C e o vetor de destino pHGWFS7. Assim, obteve-se a construção final contendo a região promotora do gene fusionada a duas proteínas repórteres, GUS e GFP. A integridade do vetor final resultante POsDEB1C:GFP:GUS foi confirmada por meio de análise com enzimas de restrição e sequenciamento. O plasmídeo contendo a construção foi posteriormente introduzido via choque térmico em A. tumefaciens para uso na transformação genética de plantas de arroz da variedade Nipponbare. Essa planta modificada permitirá detectar precisamente os locais na planta onde o gene OsDREB1C é expresso, bem como quantificar os níveis de expressão em diferentes situações e estádios de desenvolvimento. O uso de proteínas repórteres representa uma ferramenta valiosa para a visualização e análise detalhada da atividade transcricional associada a regiões regulatórias de genes de interesse, auxiliando na sua caracterização funcional. Instituições financiadoras: UFRRJ, PPGA-CS, CAPES, Faperj

Título do Evento: XI Reunião Anual de Iniciação Científica da UFRRJ (RAIC 2024) & V Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação (RAIDTec 2024)
Cidade do Evento: Seropédica
Título dos Anais do Evento: Anais da XI Reunião Anual de Iniciação Científica da UFRRJ (RAIC) e V Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação (RAIDTec): Transição energética: impactos ambientais e sociais
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

SOPRANI, Dandara Verissimo et al.. OBTENÇÃO DE CONSTRUÇÃO GENÉTICA PARA LOCALIZAÇÃO DAS REGIÕES DE EXPRESSÃO DO GENE OSDREB1C EM PLANTAS DE ARROZ (ORYZA SATIVA L.).. In: Anais da XI Reunião Anual de Iniciação Científica da UFRRJ (RAIC) e V Reunião Anual de Iniciação em Desenvolvimento Tecnológico e Inovação (RAIDTec): Transição energética: impactos ambientais e sociais. Anais...Seropédica(RJ) UFRRJ, 2024. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/xi-raic-e-v-raidtec-ufrrj/931395-OBTENCAO-DE-CONSTRUCAO-GENETICA-PARA-LOCALIZACAO-DAS-REGIOES-DE-EXPRESSAO-DO-GENE-OSDREB1C-EM-PLANTAS-DE-ARROZ-(O. Acesso em: 18/07/2025