DETECÇÃO MOLECULAR DE PIROPLASMAS E BACTÉRIAS DA FAMÍLIA ANAPLASMATACEAE QUE CIRCULAM EM CAPIVARAS (HYDROCHOERUS HYDROCHAERIS) E SUA RELAÇÃO COM A CADEIA EPIDEMIOLÓGICA DE TRANSMISSÃO DE RICKETTSIA RICKETTSII

Christie Hellen Passos Monteiro Vaz; Gabriela Costa Silva; Laís Da Silva De Oliveira; Maristela Peckle Peixoto

Título do Trabalho

Autores

Christie Hellen Passos Monteiro Vaz
Gabriela Costa Silva
Laís Da Silva De Oliveira
Maristela Peckle Peixoto

Modalidade

Resumo: JIC

Área temática

CA: Medicina Veterinária

Data de Publicação

24/03/2022

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/viiiraic2020/380451-deteccao-molecular-de-piroplasmas-e-bacterias-da-familia-anaplasmataceae-que-circulam-em-capivaras-(hydrochoerus-

ISSN

1809-1342

Palavras-Chave

roedores silvestres; Febre Maculosa Brasileira; extração de DNA; PCR.

Resumo

Dentre as doenças transmitidas por carrapatos na América Latina, a Febre Maculosa Brasileira (FMB), causada pela bactéria Rickettsia rickettsii é a de maior importância médica. Um dos hospedeiros primários do carrapato estrela (Amblyomma sculptum), principal vetor da R. rickettsii, incluem as capivaras, as quais são consideradas excelentes reservatórios de agentes etiológicos. Porém o conhecimento sobre os hemoparasitos que circulam entre os roedores silvestres no Brasil ainda é limitado. O objetivo principal deste trabalho foi a detecção de hemoparasitos a partir das amostras de DNA de sangue total de capivaras. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética na Utilização de Animais, da Universidade de São Paulo (CEUA/USP), sob número de protocolo 5948070314/2014. Amostras de sangue total de capivaras foram inicialmente extraídas utilizando-se cinco diferentes protocolos de extração de DNA com o intuito de eleger o protocolo de extração mais adequado para as amostras de sangue total de capivara. Neste teste foram utilizadas 60 amostras de sangue de capivaras. Dentre os protocolos de extração de DNA utilizados, três foram kits comerciais (Wizard® Genomic DNA Purification Kit; QIAGEN© DNeasy Blood & Tissue Kits e MagNA Pure LC) e dois foram protocolos manuais (Método de Extração de Sais Modificado e Protocolo de Extração Manual para Sangue padronizado pela EMBRAPA). Após extraído, o DNA foi quantificado utilizando-se o espectrofotômetro NanoDrop® 2000 (Thermo Scientific). Dos cinco protocolos testados, o protocolo de Extração Manual para Sangue, padronizado pela EMBRAPA, foi o que demonstrou maior concentração de ácidos nucleicos. Com relação à pureza das amostras extraídas, o protocolo de extração manual da Embrapa foi o que apresentou melhores resultados em ambas as frações (260/280 e 260/230). No entanto, espectrofotômetro do tipo Nanodrop não deve ser utilizado como único método de avaliação de DNA genômico por ser considerado um método falho. Portanto, se faz necessário a realização de outros testes, como a Eletroforese em gel de agarose e a PCR com alvo em genes de capivara. Além desta atividade, outros objetivos foram traçados e realizados durante o período de isolamento social recomendado pelas autoridades sanitárias em virtude da Covid-19: a divulgação de informação científica de qualidade para público leigo, realizada nas mídias sociais oficiais do Laboratório de Hemoparasitos e Vetores da UFRRJ (Facebook e Instagram) e a busca por “primers” para o diagnóstico de hemoparasitos utilizando ferramentas básicas de bioinformática. Em suma, os resultados do protocolo de extração de DNA manual da Embrapa padronizado para amostras de sangue mostrou resultados promissores e tem como vantagem o baixo custo. No entanto, se faz necessário a realização de outros testes como a avaliação da integridade e quantificação relativa do DNA em gel de agarose e a avaliação por PCR antes de iniciar o diagnóstico molecular para agentes patogênicos nestas amostras.

Título do Evento: VIII Reunião Anual de Iniciação Científica (RAIC 2020) e II Reunião Anual de Iniciação em Inovação e Desenvolvimento Tecnológico (RAIDTec 2020) - UFRRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da VIII Reunião Anual de Iniciação Científica (RAIC 2020) e II Reunião Anual de Iniciação em Inovação e Desenvolvimento Tecnológico (RAIDTEC 2020)
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

VAZ, Christie Hellen Passos Monteiro et al.. DETECÇÃO MOLECULAR DE PIROPLASMAS E BACTÉRIAS DA FAMÍLIA ANAPLASMATACEAE QUE CIRCULAM EM CAPIVARAS (HYDROCHOERUS HYDROCHAERIS) E SUA RELAÇÃO COM A CADEIA EPIDEMIOLÓGICA DE TRANSMISSÃO DE RICKETTSIA RICKETTSII.. In: Anais da VIII Reunião Anual de Iniciação Científica (RAIC 2020) e II Reunião Anual de Iniciação em Inovação e Desenvolvimento Tecnológico (RAIDTEC 2020). Anais...(RJ) UFRRJ, 2020. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/VIIIraic2020/380451-DETECCAO-MOLECULAR-DE-PIROPLASMAS-E-BACTERIAS-DA-FAMILIA-ANAPLASMATACEAE-QUE-CIRCULAM-EM-CAPIVARAS-(HYDROCHOERUS-. Acesso em: 19/07/2025