PERFIL DE FORMAÇÃO DE BIOFILME POR STAPHYLOCOCCUS AUREUS ATCC 25923 E ISOLADOS DE CASOS DE MASTITE

Marcos Paulo Vieira de Oliveira; Alessandra Farias Millezi; Diogenes Dezen; Mariana Cordeiro; Marcella Zampoli de Assis; Tiago da Silva Tibolla

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Trabalho

Título do Trabalho

PERFIL DE FORMAÇÃO DE BIOFILME POR STAPHYLOCOCCUS AUREUS ATCC 25923 E ISOLADOS DE CASOS DE MASTITE

Autores

Marcos Paulo Vieira de Oliveira
Alessandra Farias Millezi
Diogenes Dezen
Mariana Cordeiro
Marcella Zampoli de Assis
Tiago da Silva Tibolla

Modalidade

Ensino Superior - Bolsistas de Projetos de Pesquisa

Área temática

Medicina Veterinária

Data de Publicação

03/10/2019

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

pt-BR

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/sepeifcconcordia2019/176005-perfil-de-formacao-de-biofilme-por-staphylococcus-aureus-atcc-25923-e-isolados-de-casos-de-mastite

ISSN

2317-8671

Palavras-Chave

infecção bacteriana, resistência bacteriana, exopolissacarídeos

Resumo

A principal causa de mastite é a infecção bacteriana e dentre as bactérias causadoras o Staphylococcus aureus se destaca, sendo caracterizado por ser uma bactéria do tipo coco, gram positiva e catalase positiva. Um dos mecanismos relacionados à capacidade de infecção e resistência bacteriana é o biofilme, uma matriz extracelular de exopolissacarídeos produzidos pela bactéria, atuando como barreira a agentes antimicrobianos.Tendo em vista a relação do S. aureus com a mastite, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o perfil de formação de biofilme de diferentes cepas de S. aureus. Um total de 30 isolados foram cedidos pelo laboratório de Microbiologia Veterinária do IFC Campus Concórdia, todos provenientes de casos de mastite bovina, para efeitos comparativos a cepa padrão ATCC de Staphylococcus aureus 25923 foi analisada . Para a análise fenotípica de formação de biofilme, os 30 isolados e cepa ATCC 25923 foram estriados em Ágar Vermelho Congo (VC) suplementado com sacarose 5%, o cultivo foi realizado em 24, 48 e 72h a 37ºC em incubadora BOD, o enegrecimento das colônias caracterizou isolados fenotipicamente produtores de biofilme. Dos isolados fenotipicamente produtores selecionou-se seis mais a cepa ATCC 25923 e um não produtor, estes foram submetidos à determinação quantitativa. A metodologia para determinação quantitativa foi o Cristal Violeta (CV), realizada em triplicata com 3 repetições. Procedeu-se inicialmente à padronização do inóculo, montou-se as microplacas de 96 poços, estas incubadas por 24, 48 e 72h em shaker orbital a 37ºC. Após incubação descartou-se o líquido e lavou-se os poços com água deionizada, após secagem foram adicionados 200 ul de metanol por 15 min, em sequência adicionou-se 200 ul de cristal violeta por cinco min, descartou-se o cristal violeta e lavou-se com água deionizada. Novamente a microplaca foi seca, e adicionado ácido acético glacial a 33%, efetuando-se leitura em espectrofotômetro a 550nm. Os isolados foram classificados de acordo com densidade óptica (DO), aqueles com DO igual ou inferior ao controle (DOc, meio inerte) foram classificados como não produtores de biofilme(np), aqueles cuja DO foi inferior a duas vezes DOc como fracos produtores (f), DO inferior a quatro vezes DO como moderadamente (m) produtores e os que apresentaram DO superior a quatro vezes DOc como fortes produtores (fr). Na análise dos resultados através do teste one-way ANOVA a 5% de significância para a DO, constatou-se que houve diferença significativa entre 24 e 48h para quatro isolados, sete isolados apresentaram diferença significativa entre 24 e 72h, de acordo com o critério de classificação: em 24h três isolados foram classificado como f, três como m, dois como fr; em 48h três foram f, um foi classificado como mo, quatro como fr. Já em 72, um foi classificado como f, dois como m, cinco como fr. A definição do perfil de formação de biofilme é a base para testes de potenciais agentes com atividade antibiofilme.

Título do Evento: Semana de Ensino, Pesquisa e Extensão 2019
Cidade do Evento: Concórdia
Título dos Anais do Evento: Anais da Semana de Ensino, Pesquisa e Extensão do IFC Campus Concórdia
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

OLIVEIRA, Marcos Paulo Vieira de et al.. PERFIL DE FORMAÇÃO DE BIOFILME POR STAPHYLOCOCCUS AUREUS ATCC 25923 E ISOLADOS DE CASOS DE MASTITE.. In: Anais da Semana de Ensino, Pesquisa e Extensão do IFC Campus Concórdia. Anais...Concórdia(SC) IFC Campus Concórdia, 2019. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/sepeifcconcordia2019/176005-PERFIL-DE-FORMACAO-DE-BIOFILME-POR-STAPHYLOCOCCUS-AUREUS-ATCC-25923-E-ISOLADOS-DE-CASOS-DE-MASTITE. Acesso em: 05/04/2026