EXPRESSÃO DAS ENZIMAS DA VIA DE MODIFICAÇÃO DE U34 EM LARVAS DE A. AEGYPTI.

Publicado em 22/03/2021 - ISBN: 978-65-5941-128-3

Título do Trabalho
EXPRESSÃO DAS ENZIMAS DA VIA DE MODIFICAÇÃO DE U34 EM LARVAS DE A. AEGYPTI.
Autores
  • Maria Clara Muller Thiele
  • Victor Hugo Silva
  • Carla Ribeiro Polycarpo
Modalidade
Resumo apresentação oral curta
Área temática
Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Biologia celular e molecular
Data de Publicação
22/03/2021
País da Publicação
Brasil
Idioma da Publicação
Português
Página do Trabalho
https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/320169-expressao-das-enzimas-da-via-de-modificacao-de-u34-em-larvas-de-a-aegypti
ISBN
978-65-5941-128-3
Palavras-Chave
Trna, A. aegypti, U34, expressão, enzima, elp3
Resumo
Os RNAs transportadores são os responsáveis por conduzir os aminoácidos utilizados durante a síntese de proteínas e traduzir a informação codificada no RNA mensageiro através do pareamento do códon-anticódon. O anticódon é composto pelos resíduos 34, 35 e 36 do tRNA. Uma das características dos tRNAs é a presença de uma grande diversidade de modificações pós-transcricionais, as que ocorrem na Uridina 34 (U34) se destacam por estarem presentes em todos os domínios da vida. Mais de 80 % dos tRNAs citosólicos em todas as espécies possuem um nucleotídeo modificado na posição 34 e essas modificações podem aumentar ou restringir as possibilidades de pareamento do anticódon do tRNA com o códon do mRNA, principalmente quando é uma uridina que está nessa posição(HUANG; JOHANSSON; BYSTRÖM, 2005). O complexo Alongador (Elp1-6) e as enzimas AlkBH8/Trm112 e ctu6/CTU2 estão envolvidos diretamente na formação das modificações 5- carbamoilmetiluridina (ncm5U), 5-metoxicarbonil-metiluridina (mcm5U) e 5- metoxicarbonil-metil-2-tiouridina (mcm5Us2) na posição 34 de diferentes tRNAs. O mosquito Aedes aegypti é um inseto hematófago e vetor de diversas doenças de importância para a saúde humana. Não existem estudos sobre as modificações de tRNAs em A. aegypti. Aqui, nosso objetivo é analisar a expressão das enzimas da via de modificação de U34 em larvas de diferentes estádios de desenvolvimento do mosquito, para isso colocamos os ovos para eclodir e coletamos larvas do primeiro ao quarto estádio. As larvas foram maceradas, o RNA total extraído e o cDNA preparado para podermos realizar a análise da expressão por PCR em tempo real. Para avaliar a eficiência da síntese dos cDNAs foi realizado o PCR convencional do gene endógeno RP49 de A. aegypti e eletroforese em gel de agarose. Os resultados preliminares mostram que conseguimos extrair eficientemente o RNA da maioria dos estádios larvais, assim como prepara o cDNA. Precisamos ainda extrair mais RNA de outras amostras de larvas e realizar a análise por PCR em tempo real. Ainda, pretendemos realizar o silenciamento da expressão de algumas das enzimas de interesse e observar o efeito no mosquito adulto e no desenvolvimento larval. (1) HUANG, B. O.; JOHANSSON, M. J. O.; BYSTRÖM, A. S. An early step in wobble uridine tRNA modification requires the Elongator complex. RNA, v. 11, n. 4, p. 424–436, 2005.
Título do Evento
XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento
Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora
Even3
Meio de Divulgação
Meio Digital

Como citar

THIELE, Maria Clara Muller; SILVA, Victor Hugo; POLYCARPO, Carla Ribeiro. EXPRESSÃO DAS ENZIMAS DA VIA DE MODIFICAÇÃO DE U34 EM LARVAS DE A. AEGYPTI... In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/320169-EXPRESSAO-DAS-ENZIMAS-DA-VIA-DE-MODIFICACAO-DE-U34-EM-LARVAS-DE-A-AEGYPTI. Acesso em: 07/02/2025

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