NEUTRALIZAÇÃO DE PSEUDOTIPOS

Publicado em 22/03/2021 - ISBN: 978-65-5941-128-3

Título do Trabalho
NEUTRALIZAÇÃO DE PSEUDOTIPOS
Autores
  • Josiane de Almeida Carvalho
  • pedro telles calil
  • Vinícius Wakoff
  • Luciana Jesus da Costa
Modalidade
Resumo apresentação oral curta
Área temática
Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Virologia
Data de Publicação
22/03/2021
País da Publicação
Brasil
Idioma da Publicação
Português
Página do Trabalho
https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/319925-neutralizacao-de-pseudotipos
ISBN
978-65-5941-128-3
Palavras-Chave
SARS-CoV-2, pseudotipados, soroneutralização, ACE-2.
Resumo
Em março de 2020 a OMS declarou oficialmente que as proporções de infecções pelo vírus SARS-CoV-2 atingiu as de uma pandemia. Devido à essa emergência global, estudos para o entendimento do vírus, a interação vírus-célula e os aspectos fisiopatológicos da doença causada por ele (COVID-19) têm se ampliado. Um desses estudos se concentra em investigar o desenvolvimento de anticorpos neutralizantes, sendo primordial para o desenvolvimento de antivirais e de vacinas eficazes. O SARS-CoV-2, pertencente à família Coronaviridae, inicia a entrada da partícula viral nas células hospedeiras a partir da interação de sua proteína de envelope S com o receptor da célula, ACE-2, a enzima conversora de angiotensina 2. Além de ser essencial para a entrada do vírus na célula, a proteína S é o foco de diversos estudos relacionados a antivirais e à vacina. Uma das abordagens que vem sendo utilizada em pesquisa com o SARS-CoV-2 é o uso de vírus pseudotipados, o que garante a possibilidade dos ensaios serem feitos em NB-2. No presente trabalho foram realizados ensaios de soroneutralização com base em partículas de vírus pseudotipados. As partículas geradas não infecciosas e não replicantes são de HIV-1 pseudotipadas com o envelope do SARS-CoV-2. Ela empacota, como genoma, a sequência de RNA que codifica para Luciferase, uma proteína capaz de emitir fluorescência. A infecção de células com essa partícula pseudotipada é confirmada a partir da detecção da luz emitida. A célula utilizada é a 293t-ACE2, célula de rim embrionário humano e que foi transformada para expressar o receptor do vírus, ACE-2. O objetivo do trabalho é avaliar a atividade neutralizante de soros obtidos de pacientes convalescentes, através de ensaios cegos de soroneutralização. Foram utilizadas 450 amostras de soro já coletado de pacientes com variação entre 7 dias a 6 meses da doença (todos foram confirmados por RT-PCR) e a coleta aconteceu entre abril e outubro de 2020 pela Triagem Bloco-N, no Centro de Ciências da Saúde da UFRJ. A coleta das amostras foi aprovada pelo comitê de ética em pesquisa em humanos e faz parte dos projetos de pesquisa sob a responsabilidade da Triagem Bloco-N UFRJ. Para a realização dos ensaios em placa de 96 poços, foram adicionados na placa alguns poços de controle: MOCK (apenas célula), um controle positivo de neutralização (vírus + soro sabidamente neutralizante) e o controle de infecção (apenas vírus). Esse procedimento é necessário para que ao final possa-se comparar os resultados e definir a ação neutralizante. Enfim, a placa é lida no Promega GloMax, um aparelho de leitura de microplacas capaz de detectar luminescência mediante à reação da luciferase, então é feita a análise que leva em conta as diluições seriadas feitas e os poços de controle. Os resultados obtidos através do soro de convalescentes indicaram que alguns (17787; 12167; 11791) apresentaram taxa de 90% de neutralização até certo nível de diluição (1:1250). Os ensaios realizados neste estudo auxiliam para estudar as características qualitativas desses soros e contribuem para a realização de projetos de pesquisa variados, como o estudo da resposta imune humoral de pacientes. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS GAEBLER, C et al. Evolution of Antibody Immunity to SARS-CoV-2. bioRxiv, 2020. SCHMIDT, F et al. Measuring SARS-CoV-2 neutralizing antibody activity using pseudotyped and chimeric viruses. bioRxiv, 2020. LEI, C et al. Neutralization of SARS-CoV-2 spike pseudotyped virus by recombinant ACE2-Ig. Nature, 2020.
Título do Evento
XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento
Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora
Even3
Meio de Divulgação
Meio Digital

Como citar

CARVALHO, Josiane de Almeida et al.. NEUTRALIZAÇÃO DE PSEUDOTIPOS.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/319925-NEUTRALIZACAO-DE-PSEUDOTIPOS. Acesso em: 15/02/2025

Trabalho

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