LIBERAÇÃO DE REDES EXTRACELULARES DE MASTÓCITOS INDUZIDAS POR LEISHMANIA

Sergio Antonio Souza Jr; Caroline Moutinho; ELVIRA MARIA SARAIVA CHEQUER BOU HABIB

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Trabalho

Título do Trabalho

LIBERAÇÃO DE REDES EXTRACELULARES DE MASTÓCITOS INDUZIDAS POR LEISHMANIA

Autores

Sergio Antonio Souza Jr
Caroline Moutinho
ELVIRA MARIA SARAIVA CHEQUER BOU HABIB

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Imunologia

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

pt-BR

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/318954-liberacao-de-redes-extracelulares-de-mastocitos-induzidas-por-leishmania

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Leishmania amazonensis, macrófagos, MCETs

Resumo

Durante a infecção por Leishmania amazonensis, agente causador da leishmaniose cutânea, o inseto vetor inocula formas promastigotas em uma poça de sangue, onde o parasita entra em contato com diferentes células do sistema imune inato. Os mastócitos são granulócitos residentes em tecidos que modulam a resposta imune através da liberação de vários mediadores. Já foi demonstrado que os mastócitos, pelo mecanismo de etose, liberam redes extracelulares de DNA compostas por cromatina, histonas e proteínas granulares (MCETs), que são capazes de capturar bactérias e ainda possuem atividade bactericida (von Kockritz-Blickwede et al., 2008) Já foi mostrado que promastigotas são fagocitados por macrófagos onde se replicam, e mantém a infecção no hospedeiro vertebrado. Vários estudos implicam os mastócitos na primeira linha de defesa contra Leishmania, mas a indução e o papel das MCETs ainda precisam ser melhor elucidados. O objetivo do nosso trabalho é avaliar se promastigotas de L. amazonensis induzem a liberação de MCETs, e o papel dessas redes durante a infecção pelo parasito. Nesse estudo utilizamos a linhagem de mastócitos humanos, HMC-1, mantida em meio de cultura DMEM suplementado com 20% de soro fetal bovino, glutamina 2 mM, 40 µg/ml de gentamicina a 37oC, 5% CO2. Para o ensaio de liberação de MCETs, HMC-1 foi incubada em meio RPMI sem soro com promastigotas e a liberação de MCETs foi quantificada nos sobrenadantes das culturas com Quanti-it™PicoGreen®. Nossos resultados mostraram que os promastigotas induzem a liberação de MCETs em HMC-1 por dois mecanismos: etose clássica e rápida. Para avaliar o papel das MCETs na infecção por Leishmania, foi realizado um ensaio de sobrevivência onde o parasito foi incubado ou não com sobrenadante rico em MCETs, previamente preparado, em diferentes concentrações. Após 4 h a 35oC, foi adicionado iodeto de propídio (PI – 10 µg/ml) e as amostras analisadas no FACScalibur. Nossos resultados mostraram que nas concentrações testadas as MCETs não demonstraram atividade leishmanicida. Estudos mostram que as MCETs, são capazes de prender e matar bactérias e também prender fungos (Lopes et al., 2015). Por esses motivos investigamos o papel das MCETs em macrófagos infectados por L. amazonensis. Para esse estudo foi utilizada a linhagem de monócito humano, THP-1, cultivadas em meio RPMI suplementado com 10% de soro fetal bovino e 0,1% de penicilina e estreptomicina, diferenciada em macrófagos com PMA. Promastigotas (1:5) foram pré-incubados com diferentes concentrações de sobrenadante rico em MCETs (100, 200 e 300 ng/ml) por 20 minutos e em seguida incubados com macrófagos diferenciados de THP-1, por 4 horas a 35°C, 5% CO2. Nossos resultados mostraram MCETs são capazes de influenciar na infecção dos mascrófagos. Referências Bibliográficas Lopes JP, Stylianou M, Nilsson G, Urban CF. 2015. Opportunistic pathogens Candida albicans elicits a temporal response in primary human mast cells. Scientific Reports – Nature. 5:12287 von Köckritz-Blickwede, Maren Goldmann, Oliver Thulin, Pontus P, Heinemann K, Norrby-Teglund A, Rohde M, Medina E. 2008. Phagocytosis-independent antimicrobial activity of mast cells by means of extracellular trap formation. Blood. 111; 6. 3070-80.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

JR, Sergio Antonio Souza; MOUTINHO, Caroline; HABIB, ELVIRA MARIA SARAIVA CHEQUER BOU. LIBERAÇÃO DE REDES EXTRACELULARES DE MASTÓCITOS INDUZIDAS POR LEISHMANIA.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/318954-LIBERACAO-DE-REDES-EXTRACELULARES-DE-MASTOCITOS-INDUZIDAS-POR-LEISHMANIA. Acesso em: 12/05/2026