CARACTERIZAÇÃO ESTRUTURAL DA PROTEÍNA HCP1 DO SISTEMA DE SECREÇÃO DO TIPO VI (T6SS) DE KLEBSIELLA PNEUMONIAE

Matheus Oliveira Monteiro; Gisele Cardoso de Amorim; Felipe Henrique Peçanha

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Trabalho

Título do Trabalho

CARACTERIZAÇÃO ESTRUTURAL DA PROTEÍNA HCP1 DO SISTEMA DE SECREÇÃO DO TIPO VI (T6SS) DE KLEBSIELLA PNEUMONIAE

Autores

Matheus Oliveira Monteiro
Gisele Cardoso de Amorim
Felipe Henrique Peçanha

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Campus Duque de Caxias/Bioquímica

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/318233-caracterizacao-estrutural-da-proteina-hcp1-do-sistema-de-secrecao-do-tipo-vi-(t6ss)-de-klebsiella-pneumoniae

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

Klebsiella, T6SS, Hcp1

Resumo

A infecção por bactérias super-resistentes é um dos principais problemas da microbiologia médica atual. Essas cepas adquirem resistência por conta do uso incorreto de antibióticos e desencadeiam enfermidades com alto grau de mortalidade. A Klebsiella pneumoniae é uma espécie Gram-negativa de bactéria, que possui cepas resistentes a diferentes antibióticos, como a Klebsiella pneumoniae carbapenemase. Estas se relacionam à ocorrência de infecções sistêmicas e hospitalares que afetam principalmente o sistema respiratório do hospedeiro. Esse micro-organismo possui diferentes fatores de virulência, que o permitem interagir e afetar o hospedeiro. Estudá-los é de grande importância para gerar conhecimento de base para a criação de novos fármacos, mais eficientes contra o patógeno. Um destes fatores de virulência é o Sistema de Secreção do Tipo VI (T6SS), um complexo proteico em formato de agulha com estrutura evolutivamente relacionada com a de bacteriófagos. O T6SS apresenta um papel biológico importante na competição e na ação contra eucariotos. Ele atua secretando uma grande variedade de moléculas efetoras, no meio extracelular ou no interior de células-alvo, que podem interagir e afetar suas estruturas e vias metabólicas. Considerando a importância de compreender e combater as bactérias super-resistentes, o projeto propõe caracterizar estruturalmente uma das proteínas constituintes do T6SS, a fim de elucidar os mecanismos de virulência dessa bactéria. No genoma de K. pneumoniae foram encontradas duas cópias da proteína Hcp (hemolysin co-regulated protein), Hcp1 e 2. A Hcp1 é composta por 175 resíduos, e sua polimerização forma o tubo interno do T6SS, responsável pela translocação das moléculas efetoras. Sua função na célula hospedeira ainda é desconhecida. Busca-se compreender sua relação com as outras proteínas desse sistema, e ainda compará-la com a Hcp2 para determinar uma possível redundância ou revelar suas funções distintas. Realizamos a expressão heteróloga da Hcp1 em cepas de Escherichia coli, utilizando um plasmídeo otimizado (pET-28a). A proteína encontrava-se insolúvel, e foi então purificada na presença de ureia (agente desnaturante) por cromatografia por afinidade e exclusão molecular. Para a obtenção de um modelo estrutural da Hcp1, utilizamos ferramentas de bioinformática, como a modelagem molecular por homologia. Este modelo foi utilizado para a predição de resíduos de aminoácidos que poderiam ser responsáveis pela agregação da proteína, dificultando sua solubilização. Com estes dados, fizemos a proposição de mutantes de Hcp1, visando sua expressão solúvel. As análises seguintes compreenderão a expressão e purificação dos mutantes, seguidas de observação destas amostras por cromatografia de exclusão molecular e ressonância magnética nuclear. Entender a estrutura dessa proteína é essencial para a compreensão do T6SS e seu impacto na virulência da Klebsiella pneumoniae, colaborando para o desenvolvimento de novos fármacos

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

MONTEIRO, Matheus Oliveira; AMORIM, Gisele Cardoso de; PEÇANHA, Felipe Henrique. CARACTERIZAÇÃO ESTRUTURAL DA PROTEÍNA HCP1 DO SISTEMA DE SECREÇÃO DO TIPO VI (T6SS) DE KLEBSIELLA PNEUMONIAE.. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/318233-CARACTERIZACAO-ESTRUTURAL-DA-PROTEINA-HCP1-DO-SISTEMA-DE-SECRECAO-DO-TIPO-VI-(T6SS)-DE-KLEBSIELLA-PNEUMONIAE. Acesso em: 03/05/2025