EFEITO DE DOMÍNIOS POLI BÁSICOS NA REGULAÇÃO DE PROTEÍNAS: IDENTIFICAÇÃO DE ALVOS ENDÓGENOS DO COMPLEXO RQC (RIBOSOME-ASSOCIATED QUALITY CONTROL)

Géssica Cabral Barros; Ramon C G Baptista; Fernando Lucas Palhano Soares

Título do Trabalho

Autores

Géssica Cabral Barros
Ramon C G Baptista
Fernando Lucas Palhano Soares

Modalidade

Resumo apresentação oral padrão

Área temática

Centro de Ciências da Saúde (CCS)/Bioquímica

Data de Publicação

22/03/2021

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

Português

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/jgmictac/316933-efeito-de-dominios-poli-basicos-na-regulacao-de-proteinas--identificacao-de-alvos-endogenos-do-complexo-rqc-(ribo

ISBN

978-65-5941-128-3

Palavras-Chave

ribossomo, estagnação, domínios poli básicos, RQC

Resumo

Proteínas contendo regiões onde se concentram aminoácidos de carga positiva podem apresentar baixa eficiência durante o processo de tradução. Isto é explicado pela estagnação do ribossomo nestas regiões poli-básicas causada pelas interações eletrostáticas entre o peptídeo nascente carregado positivamente e o túnel de saída do ribossomo, que contém carga negativa devido à presença de RNAs em sua estrutura (Requião et al.,2020). A estagnação do ribossomo leva a ativação de vias de degradação do RNA mensageiro que está sendo traduzido e do peptídeo nascente, sendo está última mediada pelo complexo RQC. A função deste complexo é reciclar os ribossomos estagnados para que eles estejam disponíveis na célula, além de eliminar peptídeos nascentes aberrantes que podem comprometer a proteostase (Joazeiro et al., 2019). Além disso, esse complexo foi descrito participar da regulação dos níveis de Rqc1, proteína que compõe o RQC e é essencial para sua atividade. A regulação de Rqc1 ocorre por meio de uma região poli-básica conservada na região N-terminal da proteína (Brandman et al., 2012). Neste projeto, verificamos se o RQC atua regulando os níveis de outras proteínas endógenas contendo regiões poli-básicos semelhantes ou maiores a região presente em Rqc1. Para isso testamos seis proteínas candidatas de Saccharomyces cerevisiae (Yro2, Dbp3, YNL143C, YHR131C, Nop56 e Nop58) através da criação de cepas deletadas para dois genes que codificam proteínas envolvidas na regulação mediada pelo complexo, Ltn1 e Asc1. As deleções foram feitas através da inserção do gene de resistência a geneticina na região codificadora destes genes por recombinação homóloga e confirmadas por PCR e western blot. Os níveis de cada proteína nas diferentes cepas foram comparados por western blot. Como resultado, não observamos o aumento esperado nos níveis de nenhuma das proteínas testadas nos diferentes mutantes em relação aos níveis da proteína na cepa wild type. Para as proteínas Yro2, YHR131C e YNL143C foi observado uma diminuição no nível destas na deleção de Asc1. Este resultado não representa uma regulação mediada pelo RQC e precisa ser melhor investigado. Com isso, concluímos que somente a presença de regiões contendo aminoácidos de carga positiva nas proteínas não é suficiente para recrutar o complexo e que regulação mediada pelo RQC depende de outros fatores que serão explorados em estudos futuros. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS Brandman, O. et al. A Ribosome-Bound Quality Control Complex Triggers Degradation of Nascent Peptides and Signals Translation Stress, Cell, 2012, 151, 1042–1054. Joazeiro,C.A.P. et al. Mechanisms and functions of ribosome-associated protein quality control. Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 2019, 20, 368–383. Requião, R. D. et al. Influence of nascente polypeptide positive charges on translation dynamics. Biochemical Journal, 2020, 477, 2921-2934.

Título do Evento: XLII Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural (JICTAC 2020 - Edição Especial) - Evento UFRJ
Título dos Anais do Evento: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

BARROS, Géssica Cabral; BAPTISTA, Ramon C G; SOARES , Fernando Lucas Palhano Soares . EFEITO DE DOMÍNIOS POLI BÁSICOS NA REGULAÇÃO DE PROTEÍNAS: IDENTIFICAÇÃO DE ALVOS ENDÓGENOS DO COMPLEXO RQC (RIBOSOME-ASSOCIATED QUALITY CONTROL).. In: Anais da Jornada Giulio Massarani de Iniciação Científica, Tecnológica, Artística e Cultural. Anais...Rio de Janeiro(RJ) UFRJ, 2021. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/jgmictac/316933-EFEITO-DE-DOMINIOS-POLI-BASICOS-NA-REGULACAO-DE-PROTEINAS--IDENTIFICACAO-DE-ALVOS-ENDOGENOS-DO-COMPLEXO-RQC-(RIBO. Acesso em: 08/06/2025