CULTIVO CELULAR E TRIAGEM MOLECULAR DE BACTÉRIAS DA ORDEM RICKETTSIALES A PARTIR DE CTENOCEPHALIDES FELIS FELIS EM CÉLULAS VERO

Victor Figueiroa Andrade; Jônathan David Ribas Chagas; Isadora dos Santos Dias; Ana Clara Rodrigues Felix Da Silva; Ester Oliozi Marré; Matheus Dias Cordeiro; THAIS RIBEIRO CORREIA AZEVEDO; Claudia Bezerra da Silva; Bruna de Azevedo Baêta

Título do Trabalho

Autores

Victor Figueiroa Andrade
Jônathan David Ribas Chagas
Isadora dos Santos Dias
Ana Clara Rodrigues Felix Da Silva
Ester Oliozi Marré
Matheus Dias Cordeiro
THAIS RIBEIRO CORREIA AZEVEDO
Claudia Bezerra da Silva
Bruna de Azevedo Baêta

Modalidade

Resumo

Área temática

Protozoologia e patógenos transmitidos por vetores

Data de Publicação

24/09/2026

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

pt-BR

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/23-congresso-brasileiro-de-parasitologia-veterinaria-673729/1564434-cultivo-celular-e-triagem-molecular-de-bacterias-da-ordem-rickettsiales-a-partir-de-ctenocephalides-felis-felis-

ISBN

978-65-272-2733-5

Palavras-Chave

Isolamento in vitro, Rickettsiaceae, Anaplasmataceae, Biologia molecular

Resumo

Culturas in vitro permitem estudar interações vetor-patógeno, além de viabilizarem métodos diagnósticos e a obtenção de antígenos, reduzindo também a necessidade do uso de animais experimentais. Bactérias da ordem Rickettsiales compreendem microrganismos intracelulares obrigatórios de relevância para a saúde animal e humana, transmitidos principalmente por artrópodes hematófagos, como carrapatos e pulgas. Entre esses ectoparasitos, Ctenocephalides felis felis destaca-se pela ampla distribuição geográfica e pela capacidade de parasitar animais domésticos e silvestres. Nesse contexto, o presente estudo teve como objetivo realizar o isolamento de bactérias da ordem Rickettsiales a partir de pulgas C. felis felis utilizando células Vero. Para isso, foram preparados 10 pools contendo cinco exemplares adultos de pulgas, submetidos previamente à desinfecção superficial com álcool 70%, hipoclorito de sódio a 1% e clorexidina a 0,2%. Após lavagem em água ultrapura autoclavada, os espécimes foram macerados e o material obtido inoculado em monocamadas de células Vero mantidas em meio Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM) suplementado com 10% de soro fetal bovino. As culturas foram incubadas a 30°C e monitoradas diariamente por microscopia invertida, sendo realizadas trocas de meio semanalmente. Esfregaços obtidos por citocentrifugação foram fixados em metanol e corados com Giemsa para avaliação microscópica. O DNA foi extraído do sobrenadante das culturas utilizando o kit Wizard Genomic DNA Purification (Promega®), conforme as recomendações do fabricante. Considerando a suspeita de infecção por agentes da ordem Rickettsiales, realizou-se triagem molecular para membros da família Anaplasmataceae utilizando primers direcionados ao gene 16S rRNA (345 pb), além de PCR para o gênero Rickettsia baseada na amplificação de fragmento do gene gltA (401 pb). As amostras positivas foram posteriormente submetidas a nova PCR para amplificação de um fragmento maior do gene gltA (834 pb), visando posterior sequenciamento molecular. Dos 10 frascos inoculados, oito apresentaram contaminação bacteriana ou fúngica durante o cultivo. Nos dois frascos restantes foram observadas estruturas bacterianas compatíveis com microrganismos intracelulares em esfregaços corados. Ambas as amostras apresentaram amplificação molecular compatível com Rickettsia spp., enquanto uma delas também foi positiva para membros da família Anaplasmataceae. Atualmente, os isolados encontram-se na terceira passagem e aguardam os resultados de sequenciamento. Os achados indicam a presença de DNA de bactérias da ordem Rickettsiales em culturas derivadas de C. felis felis, contribuindo para o entendimento da associação entre pulgas e bactérias intracelulares e fornecendo evidências preliminares para futuras investigações moleculares e epidemiológicas.

Título do Evento: 23º Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária
Cidade do Evento: Belo Horizonte
Título dos Anais do Evento: Anais do XXIII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

ANDRADE, Victor Figueiroa et al.. CULTIVO CELULAR E TRIAGEM MOLECULAR DE BACTÉRIAS DA ORDEM RICKETTSIALES A PARTIR DE CTENOCEPHALIDES FELIS FELIS EM CÉLULAS VERO.. In: Anais do XXIII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária. Anais...Belo Horizonte(MG) Centro de Atividades Didáticas I (CAD 1) da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), 2026. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/23-congresso-brasileiro-de-parasitologia-veterinaria-673729/1564434-CULTIVO-CELULAR-E-TRIAGEM-MOLECULAR-DE-BACTERIAS-DA-ORDEM-RICKETTSIALES-A-PARTIR-DE-CTENOCEPHALIDES-FELIS-FELIS-. Acesso em: 01/11/2026