Anais do XXIII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária

EXTRAÇÃO DE DNA EM TOXOCARA SPP.: O MELHOR MÉTODO DEPENDE DA AMOSTRA?

Publicado em 24/09/2026 - ISBN: 978-65-272-2733-5

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Título do Trabalho

EXTRAÇÃO DE DNA EM TOXOCARA SPP.: O MELHOR MÉTODO DEPENDE DA AMOSTRA?

Autores

Valeria de Jesus Borges
Vivian Samille Ferreira Firmo
Joelande Esquivel Correia
Aristeu Vieira da Silva

Modalidade

Resumo

Área temática

Helmintologia

Data de Publicação

24/09/2026

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

pt-BR

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/23-congresso-brasileiro-de-parasitologia-veterinaria-673729/1551812-extracao-de-dna-em-toxocara-spp--o-melhor-metodo-depende-da-amostra

ISBN

978-65-272-2733-5

Palavras-Chave

toxocaríase, diagnóstico molecular, sequenciamento genético, filogenia, qualidade de ácido nucleico

Resumo

A toxocaríase é uma zoonose amplamente distribuída e negligenciada cujo diagnóstico e compreensão epidemiológica dependem de ferramentas moleculares robustas. Contudo, a obtenção de DNA de alta qualidade a partir de amostras ambientais e de ovos de Toxocara spp. representa um grande desafio metodológico, limitando frequentemente o sucesso em análises de sequenciamento genético e estudos de filogenética. Buscando transpor essa barreira técnica, o presente estudo teve como objetivo comparar a eficiência de dois protocolos de extração de DNA — clássico (baseado em fenol, clorofórmio e tiocianato de guanidina) e magnético (sistema semi-automatizado por esferas magnéticas) — aplicados a vermes adultos e ovos do parasito. O desenho experimental envolveu 48 amostras biológicas (24 adultos e 24 ovos), avaliando variáveis como o meio de armazenamento/ressuspensão e a aplicação de choque térmico. O material extraído foi analisado quanto ao rendimento, pureza e sucesso de amplificação por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR) para os genes mitocondriais pcox1 e pnad1. Modelagem hierárquica bayesiana (MHB) foi realizada sobre os resultados usando scripts em R refinados e validados usando a plataforma de inteligência artificial generativa ChatGPT Thinking 5.5. Os resultados evidenciaram que a eficiência da extração é altamente dependente do tipo de amostra. Nos vermes adultos, o método clássico gerou maior rendimento absoluto de DNA (mediana de 474,4 ng/µL); entretanto, o sistema magnético foi capaz de produzir extratos de pureza significativamente superior, o que se traduziu em um sucesso de amplificação muito mais robusto, sobretudo para o gene pcox1 (100% de positividade). Isso demonstra que, em tecidos adultos, a qualidade do DNA é mais determinante para a PCR do que sua concentração aparente. Por outro lado, para as extrações a partir de ovos, o padrão inverteu-se: o método clássico foi claramente superior ao magnético, proporcionando simultaneamente os maiores rendimentos (58,4 ng/µL vs. 6,6 ng/µL), a melhor relação de pureza e os índices mais elevados de positividade global na PCR. O efeito do choque térmico nos adultos não foi consistente em influenciar a amplificação. Conclui-se que a padronização laboratorial deve considerar a natureza da amostra, recomendando-se fortemente o método clássico para extração em ovos e o sistema magnético para vermes adultos. Essas descobertas são essenciais para otimizar rotinas moleculares e garantir a viabilidade de análises complexas na área da filogenética e diagnóstico epidemiológico da toxocaríase.

Título do Evento: 23º Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária
Cidade do Evento: Belo Horizonte
Título dos Anais do Evento: Anais do XXIII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

BORGES, Valeria de Jesus et al.. EXTRAÇÃO DE DNA EM TOXOCARA SPP.: O MELHOR MÉTODO DEPENDE DA AMOSTRA?.. In: Anais do XXIII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária. Anais...Belo Horizonte(MG) Centro de Atividades Didáticas I (CAD 1) da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), 2026. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/23-congresso-brasileiro-de-parasitologia-veterinaria-673729/1551812-EXTRACAO-DE-DNA-EM-TOXOCARA-SPP--O-MELHOR-METODO-DEPENDE-DA-AMOSTRA. Acesso em: 21/10/2026

Trabalho