DESENVOLVIMENTO DE UM ENSAIO DE PCR EM TEMPO REAL PARA DETECÇÃO E QUANTIFICAÇÃO DE BABESIA GOIANIAENSIS EM CAPIVARAS

Warley Vieira de Freitas Paula; Sueli Akemi Taniwaki; Lucianne Cardoso Neves; Gabriel Cândido dos Santos; Bruna Rodrigues Soares; Rodrigo Araújo Camêlo; Felipe da Silva Krawczak; Marcelo Bahia Labruna

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Trabalho

Título do Trabalho

DESENVOLVIMENTO DE UM ENSAIO DE PCR EM TEMPO REAL PARA DETECÇÃO E QUANTIFICAÇÃO DE BABESIA GOIANIAENSIS EM CAPIVARAS

Autores

Warley Vieira de Freitas Paula
Sueli Akemi Taniwaki
Lucianne Cardoso Neves
Gabriel Cândido dos Santos
Bruna Rodrigues Soares
Rodrigo Araújo Camêlo
Felipe da Silva Krawczak
Marcelo Bahia Labruna

Modalidade

Resumo

Área temática

Protozoologia e patógenos transmitidos por vetores

Data de Publicação

24/09/2026

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

pt-BR

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/23-congresso-brasileiro-de-parasitologia-veterinaria-673729/1546906-desenvolvimento-de-um-ensaio-de-pcr-em-tempo-real-para-deteccao-e-quantificacao-de-babesia-goianiaensis-em-capiv

ISBN

978-65-272-2733-5

Palavras-Chave

Babesiose, Hydrochoerus hydrochaeris, qPCR

Resumo

A babesiose é uma hemoparasitose emergente causada por protozoários intraeritrocitários do gênero Babesia, com distribuição mundial e grande importância para a saúde pública e para a medicina veterinária. Recentemente, uma nova espécie de piroplasmídeo, Babesia goianiaensis nov. sp., foi descrita em capivaras (Hydrochoerus hydrochaeris) e em carrapatos do gênero Amblyomma, associados a esse roedor. O presente estudo teve como objetivo descrever o desenvolvimento de um ensaio de PCR em tempo real (qPCR) baseado em sistema de sonda de hidrólise para a detecção de B. goianiaensis em amostras de capivaras. O ensaio teve como alvo o gene da subunidade III do citocromo c oxidase (Cox-3), amplificando um fragmento de 89 pb de B. goianiaensis. O gene Cox-3 foi selecionado como alvo devido ao seu maior número de cópias em comparação ao gene da subunidade ribossômica pequena (18S rRNA), sendo, consequentemente, um alvo mais sensível para ensaios de PCR. Cada corrida de qPCR incluiu controles sabidamente positivos (DNA de B. goianiaensis em amostras de capivaras) e negativos (água livre de nucleases de grau molecular). O ensaio desenvolvido demonstrou elevada especificidade, uma vez que não foram observadas amplificação inespecífica com outras espécies de Babesia sp. e demais piroplasmídeos (Cytauxzoon, Rangelia e Theileria), além de outros agentes, como Anaplasma, Ehrlichia, Rickettsia, Hepatozoon, Leishmania e Trypanosoma, testados em amostras provenientes de animais domésticos. A sensibilidade analítica do teste foi determinada por meio de diluições seriadas de plasmídeos contendo o fragmento-alvo. O limite de quantificação (LOQ) foi definido como 18 cópias/reação, com faixa linear de quantificação entre 1,8 × 105 e 1,8 × 10¹ cópias, apresentando eficiência de amplificação de 90,3% e excelente linearidade (R² = 0,999). O limite de detecção (LOD) foi estimado em 181, 18 e 9 cópias/reação, com 100% de detecção (14/14), 86,4% (19/22) e 64,3% (9/14), respectivamente. Em relação à sensibilidade diagnóstica, foram testadas cinco amostras de capivaras sabidamente positivas (Confirmadas por PCR convencional para os genes 18S rRNA e Cox 3, e sequenciamento) coletadas em Goiânia-GO, e todas apresentaram amplificação na qPCR. Os resultados obtidos indicam que o ensaio de qPCR desenvolvido constitui uma ferramenta sensível e válida para a detecção e quantificação do novo patógeno B. goianiaensis em amostras de capivaras.

Título do Evento: 23º Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária
Cidade do Evento: Belo Horizonte
Título dos Anais do Evento: Anais do XXIII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

PAULA, Warley Vieira de Freitas et al.. DESENVOLVIMENTO DE UM ENSAIO DE PCR EM TEMPO REAL PARA DETECÇÃO E QUANTIFICAÇÃO DE BABESIA GOIANIAENSIS EM CAPIVARAS.. In: Anais do XXIII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária. Anais...Belo Horizonte(MG) Centro de Atividades Didáticas I (CAD 1) da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), 2026. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/23-congresso-brasileiro-de-parasitologia-veterinaria-673729/1546906-DESENVOLVIMENTO-DE-UM-ENSAIO-DE-PCR-EM-TEMPO-REAL-PARA-DETECCAO-E-QUANTIFICACAO-DE-BABESIA-GOIANIAENSIS-EM-CAPIV. Acesso em: 16/10/2026