PADRONIZAÇÃO IMUNOHISTOQUÍMICA PARA DETECÇÃO DE ANTÍGENOS DE FASCIOLA HEPATICA EM TECIDO PULMONAR BOVINO

Ana Clara Boechat Nunes; Guilherme Drescher; Mariane Marques Da Guarda Pinto; Isabella Vilhena Freire Martins; Jankerle Neves Boeloni; Leonardo O. Trivilin; Fabiano Figueiredo

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Trabalho

Título do Trabalho

PADRONIZAÇÃO IMUNOHISTOQUÍMICA PARA DETECÇÃO DE ANTÍGENOS DE FASCIOLA HEPATICA EM TECIDO PULMONAR BOVINO

Autores

Ana Clara Boechat Nunes
Guilherme Drescher
Mariane Marques Da Guarda Pinto
Isabella Vilhena Freire Martins
Jankerle Neves Boeloni
Leonardo O. Trivilin
Fabiano Figueiredo

Modalidade

Resumo

Área temática

Helmintologia

Data de Publicação

24/09/2026

País da Publicação

Brasil

Idioma da Publicação

pt-BR

Página do Trabalho

https://www.even3.com.br/anais/23-congresso-brasileiro-de-parasitologia-veterinaria-673729/1527358-padronizacao-imunohistoquimica-para-deteccao-de-antigenos-de-fasciola-hepatica-em-tecido-pulmonar-bovino

ISBN

978-65-272-2733-5

Palavras-Chave

Fasciolose, Imunodiagnóstico, Anticorpo policlonal, Anticorpo monoclonal

Resumo

Objetivou-se padronizar a técnica de imunohistoquímica para detecção de antígenos de Fasciola hepatica em cortes histológicos, utilizando o sobrenadante de cultivo celular do hibridoma produtor do anticorpo monoclonal P1D5 (anti-ETFh, extrato total de F. hepatica), e o soro policlonal C2 obtidos de coelhos imunizados com antígenos de F. hepatica (anti-AESFh, antígenos excretor-secretor). Coletou-se adultos de F. hepatica do fígado de bovinos naturalmente infectados. Após, fixou-se os parasitos em formalina tamponada 10% e posteriormente foram submetidos ao processamento rotineiro de inclusão em parafina, obtendo cortes histológicos com espessura de 3 µm, depositados em lâminas silanizadas. Lâminas contendo tecido pulmonar bovino saudável foram utilizadas como controle negativo da reação. As lâminas foram mantidas em estufa a 60 °C por 48 horas, posteriormente submetidas à desparafinização em xilol, seguido de reidratação com etanol e lavagem em água destilada. Após, realizou-se a recuperação antigênica utilizando tampão citrato de sódio (pH 6,0) e procedeu-se ao bloqueio da peroxidase endógena com solução de peróxido de hidrogênio 9% e metanol P.A. (2:1), e bloqueio de proteína inespecífica por meio da incubação em solução de leite em pó desnatado a 3% por uma hora. Posteriormente, os anticorpos primários não diluídos (anti-ETFh e anti-AESFh) foram adicionados aos respectivos cortes histológicos e incubados em câmara úmida, protegidas da luz, permanecendo sob refrigeração a 4 °C overnight. Após, os cortes histológicos foram incubados por 30 minutos com o kit CRF Anti-Polyvalent HRP Polymer, seguido da revelação utilizando o cromógeno 3,3’-diaminobenzidina (DAB) por cinco minutos. Em seguida, realizou-se a contracoloração com hematoxilina de Harris e montagem das lâminas. Nos cortes histológicos, observou-se imunomarcação positiva com ambos anticorpos testados. O anticorpo monoclonal P1D5 apresentou imunomarcação difusa, predominantemente em estruturas internas do parasito, incluindo o parênquima e órgãos digestivos e reprodutivos. O anticorpo policlonal C2 também resultou em imunomarcação positiva intensa, principalmente em regiões tegumentares e componentes internos do parasito. Não foi observada imunomarcação nos cortes de pulmão bovino saudável utilizados como controle negativo. Os cortes do parasito com anticorpos primários suprimidos na técnica não evidenciaram marcação positiva. A padronização da técnica de imunohistoquímica demonstrou que tanto o P1D5 quanto o C2 foi capaz de reconhecer antígenos de F. hepatica em cortes histológicos do parasito, evidenciando sua aplicabilidade na detecção antigênica tecidual, independentemente da origem dos anticorpos.

Título do Evento: 23º Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária
Cidade do Evento: Belo Horizonte
Título dos Anais do Evento: Anais do XXIII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária
Nome da Editora: Even3
Meio de Divulgação: Meio Digital

Como citar

NUNES, Ana Clara Boechat et al.. PADRONIZAÇÃO IMUNOHISTOQUÍMICA PARA DETECÇÃO DE ANTÍGENOS DE FASCIOLA HEPATICA EM TECIDO PULMONAR BOVINO.. In: Anais do XXIII Congresso Brasileiro de Parasitologia Veterinária. Anais...Belo Horizonte(MG) Centro de Atividades Didáticas I (CAD 1) da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), 2026. Disponível em: https//www.even3.com.br/anais/23-congresso-brasileiro-de-parasitologia-veterinaria-673729/1527358-PADRONIZACAO-IMUNOHISTOQUIMICA-PARA-DETECCAO-DE-ANTIGENOS-DE-FASCIOLA-HEPATICA-EM-TECIDO-PULMONAR-BOVINO. Acesso em: 28/09/2026